[发明专利]一种小分子活性肽及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种小分子活性肽，其特征在于：其氨基酸序列为：LPAYPMP。

2.如权利要求1所述的小分子活性肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.原料准备

选取鲍鱼的内脏作为原料；

S2.酶解

利用碱性蛋白酶酶解鲍鱼的内脏，酶解结束后灭酶，得到酶解液；

S3.过滤

酶解液经离心、粗滤和超滤处理，收集得到小于1 kDa分子量的多条多肽，并分别冷冻干燥成粉末；

S4. 序列鉴定

取多肽冻干粉末进行序列鉴定，获得多条多肽序列，删除重复序列，筛选得到多条不重复的多肽；

S5.虚拟筛选

以蛋白质HMGR作为受体，通过对接软件将得到的多条多肽进行虚拟筛选，筛选出对接分数得分排名靠前的多肽，进行固相合成，得到权利要求1所述的小分子活性肽。

3.根据权利要求2所述的小分子活性肽的制备方法，其特征在于：步骤S2中，碱性蛋白酶添加量为的8000～12000U/g底物，pH值为9.5～10.5，底物与超纯水的比例为1：40～60，酶解温度为40～60℃，酶解时间为3～6h。

4.根据权利要求3所述的小分子活性肽的制备方法，其特征在于：步骤S2中，碱性蛋白酶添加量为的10000U/g底物，pH值为10.0，底物与超纯水的比例为1：50，酶解温度为55℃，酶解时间为4h。

5.根据权利要求2所述的小分子活性肽的制备方法，其特征在于：步骤S3中，酶解液采用平板离心机离心，采用陶瓷膜粗滤，得到的滤出液经 1 kDa的膜超滤，收集得到小于1kDa分子量的多条多肽。

6.根据权利要求2所述的小分子活性肽的制备方法，其特征在于：步骤S4中，取多肽冻干粉末经除盐柱进行除盐后，采用纳喷离子源的质谱仪进行质谱分析，得到多肽序列。

7.根据权利要求2所述的小分子活性肽的制备方法，其特征在于：步骤S5中，运用对接软件Discovery Studio对蛋白质HMGR分子加氢、去水，进行能量最小化处理，以多肽分子以Discovery Studio Client绘制小分子作为配体，最后确定蛋白质HMGR的活性口袋，在口袋范围8，盒子边缘4的条件下虚拟筛选。

8.一种蛋白和多肽的复合物，其特征在于：所述复合物中多肽及蛋白互相结合，所述多肽的氨基酸序列为LPAYPMP，所述蛋白质为HMGR蛋白质。

9.根据权利要求8所述的蛋白和多肽的复合物，其特征在于：所述HMGR蛋白质的晶体结构为1HWK。

10.权利要求1所述的小分子活性肽在制备辅助降血脂药物中的应用。