[发明专利]牛结节性皮肤病病毒阳性血清及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及兽用生物制品技术领域，尤其涉及一种牛结节性皮肤病病毒阳性血清及其制备方法和应用。本发明以灭活疫苗接种健康阴性牛，接种次数≥2次，每次接种的灭活疫苗剂量≥6mL，最终制得了一种牛结节性皮肤病病毒阳性血清。该牛结节性皮肤病病毒阳性血清的中和抗体效价≥1:32，能充分适用于疫苗研制过程中涉及的各检验项目，解决了困扰牛结节性皮肤病灭活疫苗研制过程中质量控制的瓶颈问题，填补了牛结节性皮肤病病毒阳性血清制备工艺的空白，对于兽用生物制品行业的长足发展具有重要意义。

技术领域

本发明涉及兽用生物制品技术领域，尤其涉及一种牛结节性皮肤病病毒阳性血清及其制备方法和应用。

背景技术

牛结节性皮肤病（Lumpy skin disease，LSD）是由痘病毒科的牛结节性皮肤病病毒（Lumpy skin disease virus，LSDV）引起的牛疫病，临床表现为发热、皮肤水肿及局部坚硬的结节或溃疡，会严重影响牛的生产性能、产奶量和身体状况（损坏皮张、引起流产和不育等），造成养牛产业巨大的损失，研制针对该传染病的疫苗极为迫切。

在灭活疫苗研制的过程中，需要采用特异性血清对疫苗毒进行中和。目前市面上并未有针对LSDV灭活疫苗研制的阳性血清。且在当前的研究进程中，结合LSDV病毒的特性，参考现有各类病毒阳性血清制备技术，获得的阳性血清效价普遍偏低（低于或等于1:16），无法满足疫苗研发过程中的检验需求。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种牛结节性皮肤病病毒阳性血清及其制备方法和应用。所述牛结节性皮肤病病毒阳性血清的中和抗体效价≥1:32，能充分适用于疫苗研制过程中涉及的各检验项目，解决了困扰牛结节性皮肤病灭活疫苗研制过程中质量控制的瓶颈问题，填补了牛结节性皮肤病病毒阳性血清制备工艺的空白，对于兽用生物制品行业的长足发展具有重要意义。

具体的，本发明的技术方案如下：

第一方面，本发明提供了一种牛结节性皮肤病病毒阳性血清，所述牛结节性皮肤病病毒阳性血清的中和抗体效价≥1:32；所述牛结节性皮肤病病毒阳性血清以灭活疫苗接种健康阴性牛制得，所述接种的次数≥2次；每次接种的灭活疫苗剂量≥6mL/头；优选的，每次接种的灭活疫苗剂量为8-12mL/头。

现有常规方法获得的牛结节性皮肤病病毒阳性血清效价普遍偏低（≤1:16），无法满足疫苗研发过程中的检验需求。本发明以灭活疫苗接种健康阴性牛，接种次数≥2次，每次接种的灭活疫苗剂量≥6mL，最终制得了一种牛结节性皮肤病病毒阳性血清。该牛结节性皮肤病病毒阳性血清的中和抗体效价≥1:32，能满足疫苗研发过程中涉及的各检验项目使用要求。

第二方面，本发明提供了一种牛结节性皮肤病病毒阳性血清的制备方法。所述方法使用灭活疫苗接种健康阴性牛，制得中和抗体效价≥1:32的阳性血清；所述接种的次数≥2次；每次接种的灭活疫苗剂量≥6mL/头；优选的，每次接种的灭活疫苗剂量为8-12mL/头；更优选的，每次接种的灭活疫苗剂量为10mL/头。

病毒阳性血清的生产过程须保障免疫动物的个体健康，通过持续生产阳性血清的方式，减少生成成本，避免经济损失。因此，本领域在使用牛结节性皮肤病病毒灭活疫苗接种健康阴性牛时，通常使用2-4mL/头的剂量进行免疫接种。而本发明使用超剂量注射的方式对健康阴性牛进行免疫，短时间内即获得了较高效价的牛结节性皮肤病病毒阳性血清，能满足疫苗研发过程中涉及的各检验项目使用要求。

本发明使用灭活疫苗接种健康阴性牛，所述灭活疫苗的牛结节性皮肤病病毒含量优选≥0.5×10^6.0TCID₅₀/mL，更优选≥0.5×10^7.0TCID₅₀/mL，该规格条件的灭活疫苗能获得更佳的免疫效果，进而有助于提高免疫后阳性血清的中和抗体效价。