[发明专利]一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法

权利要求书

1.一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，外植体的获得；

步骤2，愈伤组织及不定芽分化；

步骤3，不定芽增殖；

步骤4，生根培养

将增殖培养结束的植物体转移至生根培养基中培养，生根后，获得可移栽的无菌苗；

生根培养基配方如下：1L MS培养基、0.4-2mg生根因子、6-7g琼脂、25-30g蔗糖，pH5.8-6.0；

所述生根因子为IBA或景天花粉。

2.根据权利要求1所述的一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法，其特征在于，具体如下：

步骤1，外植体的获得：选取植株健壮、生长整齐的多肉植物的外植体，消毒后备用；

步骤2，愈伤组织及不定芽分化

将外植体接种在装有诱导培养基的器皿中，诱导培养至产生愈伤组织，在继代培养基中继代培养，直至由愈伤组织再分化为不定芽；

步骤3，不定芽增殖

当不定芽长至1-2cm时，在无菌环境下切下，然后转接至所述增殖培养基中；

步骤4，生根培养

将增殖培养结束的植物体转移至生根培养基中培养，生根后，获得可移栽的无菌苗；

生根培养基配方如下：1L MS培养基、0.4-2mg生根因子、6-7g琼脂、25-30g蔗糖，pH5.8-6.0。

3.根据权利要求2所述的一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法，其特征在于，所述景天为大花红景天。

4.根据权利要求3所述的一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法，其特征在于，当生根因子为IBA时，其在MS培养基中的添加量为0.4-0.6mg·L^-1；

当生根因子为景天花粉时，其在MS培养基中的添加量为0.6-2.1mg·L^-1，景天花粉使用前置于干燥容器中，然后于100℃中放置10-20min，进行灭活。

5.根据权利要求2所述的一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法，其特征在于，步骤1中，所述外植体采用多肉植物的叶片。

6.根据权利要求5所述的一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法，其特征在于，外植体取从茎尖往下数第3至6片完全叶。

7.根据权利要求5所述的一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法，其特征在于，步骤1中，外植体的消毒方法是：放在通风干燥处晾晒1-2d，用洗涤剂和软毛刷洗去植株表面附着的尘土和杂质后，用流水冲洗20-30min，无菌环境下，用体积分数75％乙醇浸泡10-30s，接着用2g·L^-1升汞溶液浸泡4-5min，最后用无菌水冲洗3-5次，用无菌干燥的滤纸吸干外植体表面水分，得到无菌外植体。

8.根据权利要求5所述的一种多肉植物组培再生体系的繁殖方法，其特征在于，步骤1中，无菌条件下，将叶片切割为(0.3-0.4)×(0.3-0.4)cm²大小的组织块，将组织块保持形态学上端朝上，形态学下端朝下接种培养基中。

9.根据权利要求2所述的多肉植物组培再生体系的繁殖方法，其特征在于，所述诱导培养基配方如下：1L MS培养基、0.5mg 6-BA、0.6mg NAA、7g琼脂、30g蔗糖，pH 5.8-6.0；

所述继代培养基配方如下：1L MS培养基、1.0mg 6-BA、0.4mg NAA、7g琼脂、30g蔗糖，pH5.8-6.0；

所述增殖培养基的成分与所述继代培养基的成分相同。

10.根据权利要求9所述的多肉植物组培再生体系的繁殖方法，其特征在

于，诱导培养、继代培养、增殖培养与生根培养的条件均为：温度为20-24℃，

环境湿度为70-80％，光周期12h光照/12h黑暗，光照强度50μmol·m^-2·s^-1。