[发明专利]一种获得大花绣球与乔木绣球种间杂交后代的方法

权利要求书

1.一种获得大花绣球与乔木绣球种间杂交后代的方法，其特征在于，其方法包括以下步骤：

(1)子房消毒：取大花绣球与乔木绣球种间杂交授粉30-45d后膨大的子房，清洗消毒；

(2)接种：剥取步骤(1)消毒后子房中的未成熟杂种胚珠并接种到1/2MS培养基上；

(3)暗培养：将步骤(2)接种后的培养基进行暗培养至杂种胚珠变绿萌发；

(4)愈伤组织诱导：将步骤(3)暗培养后转绿萌发的杂种胚珠接种到愈伤组织诱导培养基，光周期培养，期间转换一次新鲜的愈伤组织诱导培养基；

(5)增殖与分化：将步骤(4)愈伤组织诱导后形成的愈伤组织转移至增殖与分化培养基，光周期培养，期间转换一次新鲜的增殖与分化培养基；

(6)生根培养：将步骤(5)增殖与分化后生长健壮的无菌幼苗转入生根培养基进行生根培养，获得杂交苗；

(7)炼苗移栽：将步骤(6)的杂交苗移栽培育，获得大花绣球与乔木绣球种间杂交后代。

2.根据权利要求1所述的一种获得大花绣球与乔木绣球种间杂交后代的方法，其特征在于，步骤(1)中所述子房消毒时，取授粉35-45d后膨大的子房。

3.根据权利要求1所述的一种获得大花绣球与乔木绣球种间杂交后代的方法，其特征在于，步骤(1)中所述子房消毒时，将清洗后的子房用酒精浓度为75％的酒精冲洗30-60s，用无菌水冲洗后转入有效氯浓度为1.5％-2.5％的NaClO溶液中浸泡6-8min，再用无菌水冲洗。

4.根据权利要求1所述的一种获得大花绣球与乔木绣球种间杂交后代的方法，其特征在于，步骤(2)中所述接种时，吸干消毒后子房表面的水分，将子房平铺于无菌滤纸上，纵切子房，剥取子房中的未成熟杂种胚珠。

5.根据权利要求1所述的一种获得大花绣球与乔木绣球种间杂交后代的方法，其特征在于，步骤(3)中所述暗培养时，水平放置培养基，在25±2℃黑暗条件下培养7-10d。

6.根据权利要求1所述的一种获得大花绣球与乔木绣球种间杂交后代的方法，其特征在于，步骤(4)中所述愈伤组织诱导时，所述愈伤组织诱导培养基为1/2MS，还添加1.0-2.0mg/L6-BA、0.1-0.2mg/LIBA和50-100mg/LCW，所述光周期培养条件：培养温度为25±2℃，光照强度为2000-2500Lx，光照时间为12h/d，接种30-40d后，转换一次新鲜的愈伤组织诱导培养基。

7.根据权利要求1所述的一种获得大花绣球与乔木绣球种间杂交后代的方法，其特征在于，步骤(5)中所述增殖与分化时，所述增殖与分化培养基为1/2WPM，还添加0.2-0.3mg/LIBA，所述光周期培养条件：培养温度为25±2℃，光照强度为2000-2500Lx，光照时间为12h/d，接种30-40d后，期间转换一次新鲜的增殖与分化培养基。

8.根据权利要求1所述的一种获得大花绣球与乔木绣球种间杂交后代的方法，其特征在于，步骤(6)中所述生根培养时，所述生根培养基为MS，还添加0.3mg/LIBA，光周期培养条件：培养温度为25±2℃，光照强度为2000-2500Lx，光照时间为12h/d，接种30-40d后，转换一次新鲜的生根培养基。

9.根据权利要求1～8任意一项所述的一种获得大花绣球与乔木绣球种间杂交后代的方法，其特征在于，步骤(7)中所述炼苗移栽时，取生根后2-3周生长健壮的杂交苗，洗净杂交苗根部残留的所述生根培养基并移栽至育苗盒的移栽基质中，当杂交苗叶片上部接触育苗盒上盖，育苗盒限制杂交苗继续生长时，将杂交苗带移栽基质移栽到花盆中，正常栽培管理。

10.根据权利要求9所述的一种获得大花绣球与乔木绣球种间杂交后代的方法，其特征在于，步骤(7)中所述炼苗移栽时，所述移栽基质由泥炭和珍珠岩按体积比5:1-5:2组成。