[发明专利]RO8191和/或AS2863619在促进红系祖细胞或红系前体细胞分化增殖中的应用有效
申请号: | 202310907811.9 | 申请日: | 2023-07-24 |
公开(公告)号: | CN116622631B | 公开(公告)日: | 2023-10-13 |
发明(设计)人: | 杜如龙;于蕾;武雪宁;黄雯静;张成志;郜华磊;吴理达;顾雨春 | 申请(专利权)人: | 呈诺再生医学科技(北京)有限公司 |
主分类号: | C12N5/078 | 分类号: | C12N5/078;C12N5/0789 |
代理公司: | 北京预立生科知识产权代理有限公司 11736 | 代理人: | 朱萍 |
地址: | 102600 北京市大兴区经*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | ro8191 as2863619 促进 红系祖 细胞 红系前 体细胞 分化 增殖 中的 应用 | ||
1.RO8191和/或AS2863619在促进红系祖细胞或红系前体细胞分化增殖中的应用。
2.一种用于促进造血干细胞或造血祖细胞诱导分化为红系祖细胞或红系前体细胞的基础培养基,其特征在于,所述基础培养基包含RO8191和/或AS2863619。
3.根据权利要求2所述的基础培养基,其特征在于,所述基础培养基中还包含IMDM培养基、ITS-X、抗坏血酸、乙酰半胱氨酸、奎诺二甲基丙烯酸酯、BSA。
4.根据权利要求3所述的基础培养基,其特征在于,所述基础培养基中各组分的含量分别为:5 µM RO8191、1 µM AS2863619、1% ITS-X、50 µg/mL抗坏血酸、50 µM乙酰半胱氨酸、50 µM奎诺二甲基丙烯酸酯、0.5% BSA。
5.一种促进造血干细胞或造血祖细胞诱导分化为红系祖细胞或红系前体细胞的培养体系,其特征在于,所述培养体系包括红细胞特化阶段培养基、红细胞扩增阶段培养基、红细胞成熟阶段培养基;
所述红细胞特化阶段培养基包含权利要求2-4中任一项所述的基础培养基、SCF、IL-3、EPO、地塞米松;
所述红细胞扩增阶段培养基包含权利要求2-4中任一项所述的基础培养基、SCF、IL-3、EPO、地塞米松;
所述红细胞成熟阶段培养基包含权利要求2-4中任一项所述的基础培养基、SCF、EPO。
6.根据权利要求5所述的培养体系,其特征在于,所述红细胞特化阶段培养基中各组分的含量分别为:50 ng/mL SCF、10 ng/mL IL-3、10 ng/mL EPO、1 µM地塞米松;
所述红细胞扩增阶段培养基中各组分的含量分别为:50 ng/mL SCF、10 ng/mL IL-3、10 ng/mL EPO、1 µM地塞米松;
所述红细胞成熟阶段培养基中各组分的含量分别为:50 ng/mL SCF、10 ng/mL EPO。
7.一种促进造血干细胞或造血祖细胞诱导分化为红系祖细胞或红系前体细胞的方法,其特征在于,所述方法包括采用权利要求5或6所述的培养体系对造血干细胞或造血祖细胞进行培养。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
(1) Day0-6,红细胞特化阶段,采用权利要求5或6中所述的红细胞特化阶段培养基培养造血干细胞或造血祖细胞;
(2) Day6-12,红细胞扩增阶段,采用权利要求5或6中所述的红细胞扩增阶段培养基培养步骤(1)得到的细胞;
(3) Day12-15,红细胞成熟阶段,采用权利要求5或6中所述的红细胞成熟阶段培养基培养步骤(2)得到的细胞,获得红系祖细胞或红系前体细胞。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,在Day0-3、Day0-6、Day0-9、Day0-12或Day0-15期间所使用的培养基中含有RO8191和AS2863619。
10.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,步骤(1)中细胞密度为1×105个/mL;
步骤(2)中细胞密度为5×105个/mL;
步骤(3)中细胞密度为1×106个/mL。
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