[发明专利]高纯度蛋白质的制备及其应用无效

专利信息
申请号: 85101341.4 申请日: 1985-04-01
公开(公告)号: CN1007906B 公开(公告)日: 1990-05-09
发明(设计)人: 加藤光一;山田隆央;音田治夫 申请(专利权)人: 武田药品工业株式会社
主分类号: C12P21/00 分类号: C12P21/00;C12N15/11
代理公司: 中国国际贸易促进委员会专利代理部 代理人: 顾柏棣,李雒英
地址: 日本国大阪府大*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 纯度 蛋白质 制备 及其 应用
【权利要求书】:

1、一种生产基本上纯净的非糖基化的人类白细胞介素-2蛋白质的方法,所说的人类白细胞介素-2蛋白质的特异活性不低于104单位/毫克,它包括培养一种带有一种DNA的转化物,该DNA带有一个编码人类白细胞介素-2的碱基序列,从而造成在生长的细胞中生产和积累人类白细胞介素-2,特征在于用一种浓度为2-8M的胍的无机酸盐溶液从该细胞中提取人类白细胞介素-2,将这样所获取的含有人类白细胞介素-2的液体通过一个包括疏水性柱层析的提纯过程而纯化。

2、一种根据权项1所述的方法,其特征在于,所述的蛋白质具有如下所示的氨基酸序列:

X-Ala  Pro  Thr  Ser  Ser  Ser  Thr  Lys  Lys  Thr  Gln

Leu  Gln  Leu  Glu  His  Leu  Leu  Leu  Asp  Leu  Gln

Met  Ile  Leu  Asn  Gly  Ile  Asn  Asn  Tyr  Lys  Asn

Pro  Lys  Leu  Thr  Arg  Met  Leu  Thr  Phe  Lys  Phe

Tyr  Met  Pro  Lys  Lys  Ala  Thr  Glu  Leu  Lys  His

Leu  Gln  Cys  Leu  Glu  Glu  Glu  Leu  Lys  Pro  Leu

Glu  Glu  Val  Leu  Asn  Leu  Ala  Gln  Ser  Lys  Asn

Phe  His  Leu  Arg  Pro  Arg  Asp  Leu  Ile  Ser  Asn

Ile  Asn  Val  Ile  Val  Leu  Glu  Leu  Lys  Gly  Ser

Glu  Thr  Thr  Phe  Met  Cys  Glu  Tyr  Ala  Asp  Glu

Thr  Ala  Thr  Ile  Val  Glu  Phe  Leu  Asn  Arg  Trp

Ile  Thr  Phe  Cys  Gln  Ser  Ile  Ile  Ser  Thr  Leu

Thr

其中的X是甲硫氨酸或是氢。

3、一种根据权项1所述的方法,其特征在于:所述的蛋白质为冷冻干燥形式的。

4、一种根据权利要求1所述的方法,其特征在于:其中所述的疏水性柱层析是一种使用反相柱的高效液相层析。

5、一种根据权利要求5所述的方法,其特征在于,在进行层析时,所用的洗脱液的pH值为1.5至8。

6、一种根据权利要求5所述的方法,其特征在于:在进行层析时,流速为0.1至100毫升/每分钟。

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