[其他]菜籽(油)芥酸快速检测技术

说明书

发明所属技术领域：（纸）色谱技术。

在低芥酸品种的繁殖和推广中，由于分析和检测要求在农村基层进行，因此对菜籽（油）芥酸含量测定法提出了新的要求;要求设备、试剂费低廉，分析时间短，既便于处理零星，又可能较多量的处理分析样品。过去曾用于育种阶段的方法，或因设备费高，或因全分析时间太长，很难实用于农村基层油粮、种子收购等部门。

鉴于目前我国农业生产规模小而分散，基层仪器设备和技术力量都不足;因此一个不需要贵重设备，又能快速地检测芥酸含量在5%以下（供食用油用）和2%以下（供留种用）的简易检测技术是十分需要的。食品工业为了保证所生产食品中芥酸含量低，也需要一个快速简易的检测技术。本方法即为针对以上生产上的实际需要而设计并取得实效的。

本项技术是对纸色谱法应用在分离和鉴定菜籽（油）脂肪酸甲（乙）酯方面的改进。

本项技术的主要改进在于以下几点：

1、在分离技术方面：不要求分离菜籽油中的每一种脂肪酸甲（乙）酯，只要求分离或分辨出芥酸甲（乙）酯。在选用流动相（甲醇-乙醇-水）比例合适时，即指甲醇-乙醇-水的流动相相应的组成体积百分比是在50-95∶0-60∶0-10的范围中，可在10分钟内完成快速分离;与一般色谱每种不同的成份都有一个色谱点不同，本色谱图上只有两个色谱点（或一个色谱点带一拖尾斑）。

2、在点样方法和鉴别技术上：

在一般点样量的情况下，含芥酸5%以上的样品可分成两个色谱点;含量越高则芥酸点越清楚，含芥酸5%以下的样品的芥酸色谱点则变成另一色斑的拖尾斑;由此则可区别出芥酸含量5%以上或以下的样品。芥酸含量在5%以下的样品，可供制备食用油之用。

在重点样量（比一般点样多2倍以上）的情况下，在芥酸含量在2%-5%样品中，芥酸色谱点成为另一色谱点的轻微拖尾色斑;芥酸含量在2%以下的样品则无可区辨的拖尾色斑。这种油菜籽可供留种之用。

3、在显色技术上：用1-5%碘乙醇（95%）溶液，在展开后的纸谱上，可作喷雾快速显色剂。利用碘色在脂肪酸甲（乙）酯的位置上退色缓慢，在滤纸上退色较快的现象;当滤纸碘色退后，即可显出脂肪甲（乙）酯的色谱点。

本发明与现有技术相比所具的优点：我们现在提出的方法与西德纸色谱法，（《赴西德学习油菜育种的报告》华中农学院付廷栋，农业部科技局，外事局印1982年1月，14-15页）以及中国农科院油料研究所改进的西德法，都是利用纸色谱法分离鉴定芥酸。但后两种方法全分析时间要12小时以上，设备费用每套要2.000元，难于实用于农村基层。由于我们采用园纸色谱方式，并且只要求分离出芥酸，因此加快了分离速度。在采用特定的流动相时，可于8分钟完成分离，用我们提出的显色剂2-3分钟内即可显色。全分析时间在油菜收获季节单样需17分钟，100份样品集中分析时平均每个样品需1.25分钟。全部设备试剂费每套在100元左右。每个样品消耗材料及试剂费为8分钱。这样的速度和费用完全有可能适用于农村基层和基层食品工业部门。

我们提出的方法，经中国情报所重庆分所国际联机检索世界专利索引（1963-1980，1981-现在的专利文献），检索贮存号“TBO14”，前人尚未有类似专利申请。

实现本发明的最好方式是将已处理好的反相园滤纸在中心处用刀片划一条约0.7厘米长的细缝，在距该缝0.7厘米处，对称用进样毛细管点酯化好的样品溶液，每张纸可点四个点，每点为一个样，各点点样量5次（约100微升）每点一次后，再加点二次，使其成直径约0.4厘米的园点。点完样后，让石油醚自由挥发掉。

在培养皿里注入流动相溶液。剪一小滤纸条，使纸条与园纸平面垂直，滤纸条上端略露出，使皿盖和纸面离开少许距离，下端位置适宜，使纸条能放置于培养皿的溶液中。让园纸刚好放在培养皿上，然后将培养皿盖盖上。流动相甲醇∶乙醇∶水在50-95∶0-60∶0-10的范围大约8分钟后，流动相距园纸边缘1厘米时，取出园滤纸，风干。

用玻璃喷瓶将显色剂1-5%的碘乙醇液喷在风干了的园滤纸上，待底色退去后，立即根据色谱斑点进行判断，并记下结果。如果滤纸的颜色全退完还没能记下实验结果，可再向园滤纸喷一次显色剂，重新判断一次。