[发明专利]EB病毒有关疾病的体外鉴别诊断方法

权利要求书

1.一种测试药盒，它包括：

(a)含有以下成分的一组诊断上相关的抗原性EBV多肽：

(aa)由重组质粒pUCARG1140的插入片段编码的呈现EBVP138相关抗原决定基的多肽，

(ab)由重组质粒pUC8KSH1.2的插入片段编码的呈现EBV P72相关抗原决定基的多肽，

(ac)由重组质粒pUC9MBCE3.2的插入片段编码的呈现EBVP54相关抗原决定基的多肽，

(ad)由重组质粒pUR290CXH580的插入片段编码的呈现EBVP150相关抗原决定基的多肽，和/或

(ae)一种呈现EBV多肽gp250/350的抗原决定基的融合蛋白，它由重组质粒pURLP1.9或pUC19LP1.9编码。

2.根据权利要求1所述的测试药盒，它另外还含有：

(b)标记的，具有类别特异性的抗人IgG、抗人IgM和抗人IgA抗体：

(c)可被结合于b)中抗体上的酶所转化的检测试剂，和/或

(d)洗涤液及缓冲液。

3.根据权利要求1或2所说的测试药盒，其中所说的EBV多肽被偶联于ELISA微量滴定盘工聚苯乙烯小球。

4.根据权利要求1或2所说的测试药盒，其中所说的EBV多肽对应于一种不同于权利要求(1)的EBV血清型。

5.产生如权利要求1和2中任一项所述的测试药盒所含有的抗原性EBV多肽的方法，其中用一种权利要求1所述的转化

在适宜的条件下于营养培养基中培养该转化的宿主生物，然后从培养物中回收所说的EBV多肽。

6.如权利要求5所述的方法，其中所说的宿主生物为大肠杆菌，另一种细菌，酵母，另一种真菌，动物细胞或人细胞。

7.如权利要求5或6所述的方法，其中宿主生物是大肠杆菌。

8.如权利要求5或6所述的方法，其特征在于：当从培养物中回收出EBV多肽时，通过下列步骤将其纯化至99％纯度：

(a)凝胶过滤层板，其中将细菌溶解产物浮于含有去污剂的8M尿素中，

(b)(a)中分离的阳性部分作疏水层析，和

(c)通过阴离子交换层析对(b)中分离的阳性部分作进一步纯化。

9.使用权利要求1或2的测试药盒对EBV相关疾病进行不同的体外诊断。

10.如权利要求9所述的用途，其特征在于体外诊断是以放射免疫检测法(RIA)或酶联免疫吸附检测法的方式进行。

11.如权利要求9或10所述的用途，其特征在于，在测定IgA和IgM抗体之前，待测的病人血清用金黄色葡萄球菌蛋白A预先吸收，以去掉血清中所含的IgG。