[其他]从产生蛋白质的培养基中提取和净化蛋白质的方法

权利要求书

1、一种从受控酵母细胞上层清液提取和净化同细胞结合的蛋白质的方法，其特征在于这种受控酵母细胞已产生上述的蛋白质，并在非离子型洗涤剂中已将其破碎，这种方法包括下列步骤：调整上层清液的pH到6(±0.1)，然后再将液体的或固体的聚乙二醇加入到上述上层清液中直至其净化，并用二价金属阳离子或硫酸铵在超滤后处理已净化的上层清液以分离出上述蛋白质。

2、依照权利要求1的工艺程序，在上层清液中加入液体聚乙二醇直到最后浓度在10%和35%（体积/体积）之间的方法。

3、依照权利要求1的工艺程序，在上层清液中加入固体聚乙二醇，直到最后浓度在6和12%（重量/体积）之间的方法。

4、权利要求1到3提到的蛋白质是肝炎B表面抗原。

5、权利要求1到3提到的蛋白质是α-1-抗胰蛋白酶。

6、依照权利要求1到5的工艺程序，澄清的上层清液用二价金属阳离子处理。

7、权利要求6提到的二价金属阳离子是钙阳离子或锰阳离子。

8、依照权利要求6和7，工艺程序还包含沉淀的分离、溶液的超滤、保留物的凝胶渗透、含蛋白质的峰流的离子交换色谱法以及最后，第二次凝胶渗透或氯化铯梯度离心分离。

9、依照权利要求1到5的工艺程序，用硫酸铵处理澄清的上层清液直到40-50%饱和并离析此净化的蛋白质到聚乙二醇相中。

10、依照权利要求9的工艺程序，最后进一步对聚乙二醇相进行超滤，接着用凝胶渗透和离子交换色谱法。

11、按照权利要求9的方法，最后进一步对乙二醇相进行超滤，接着用离子交换色谱法和凝胶渗透。

12、依照权利要求2的工艺程序，对澄清的上层清液进行超滤，并用硫酸铵处理保留物直到40-50%饱和，以使转移到合适的缓冲液中的蛋白质沉淀。

13、依照权利要求12的工艺程序，再进一步采用超滤、凝胶渗透和离子交换色谱法。

14、依照权利要求1到5的任意一项方法，非离子型洗涤剂是一种聚山梨酸酯。

15、依照权利要求14的方法，聚山梨酸酯是聚山梨酸酯20。