[发明专利]蛋白质的生产无效
申请号: | 86102977.1 | 申请日: | 1986-04-29 |
公开(公告)号: | CN1012645B | 公开(公告)日: | 1991-05-22 |
发明(设计)人: | 北野一昭;藤本茂 | 申请(专利权)人: | 武田药品工业株式会社 |
主分类号: | C12P21/00 | 分类号: | C12P21/00 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利代理部 | 代理人: | 顾柏棣,辛敏忠 |
地址: | 日本大阪*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蛋白质 生产 | ||
1、一种增加N末端没有与转译起始密码子ATG相对应的蛋氨酸的白细胞介素2、干扰素α和干扰素-γ蛋白质产率的方法,培养具有一个表达载体的大肠杆菌,该载体在转译起始密码子下游含有为该蛋白质编码的结构基因,该方法包括在培养基中培养大肠杆菌,向该培养基中加入(1)10-6~10-3摩尔铁离子来源,锰离子来源或其混合物(当目的蛋白质为白细胞介素-2时),10-3~10-3摩尔铁离子来源。10-6~10-3摩尔锰离子来源或其混合物(当目的蛋白质为干扰素-α时),或4×10-5~10-3摩尔锰离子来源(目的蛋白质为干扰素-γ时)和(2)天然来源的氮源。
2、根据权利要求1的方法,其中的表达载体含有一启动子。
3、根据权利要求2的方法,其中的启动子是入PL启动子。
4、根据权利要求2的方法,其中的启动子是色氨酸启动子。
5、根据权利要求1的方法,其中的铁离子来源是铁盐。
6、根据权利要求5的方法,其中的铁盐是三价铁的无机酸盐。
7、根据权利要求1的方法,其中的锰离子来源是锰盐。
8、根据权利要求7的方法,其中的锰盐是无机酸盐。
9、根据权利要求1的方法,其中的氯源是酪蛋白氨基酸。
10、根据权利要求1的方法,其中的培养基含有浓度为1g/l到50g/l的氮源。
11、根据权利要求1的方法,其中的培养在酸性条件下进行。
12、根据权利要求3的方法,其中的培养在增殖期于25℃到35℃温度下进行,然后升温至约42℃。
13、根据权利要求4的方法,其中的生长维持在37℃左右进行到生长的中期,随后根据繁殖的情况降温到20℃至30℃。
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