[其他]用于固相肽合成的新载体

权利要求书

1、一种用于固相肽合成的新型载体的制备方法，它是利用氨丙基硅球末端的活泼氨基能够进一步反应产生固定相的原理，其特征在于用氨丙基硅球和叔丁氧羰酰-甘氨酸(BOC-GLYOH)为基本原料，对溴甲基甲酸为连接试剂，合成了一种新型载体：

2、根据权利要求1所述的载体的制备方法，其特征在于合成路线与工艺包括：

2·1  用对溴甲基苯甲酸（Ⅰ）与ω-溴苯乙酮（Ⅱ）在三乙胺存在下，乙酸乙酯溶剂中反应生成对溴甲基苯甲酸苯甲酰甲基酯（Ⅲ）。

2·11 反应温度为50-60℃，反应后静置滤除沉淀。滤液先用10%的柠檬酸水溶液洗涤，再用饱和的氯化钠水溶液洗涤，最后用饱和碳酸钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，蒸除溶剂得固体，固体用CH₂Cl₂/石油醚（体积比4∶3）回流溶解，冷却得白色晶体。

2·2  用权利要求2、1所述的生成物（Ⅲ）与叔丁氧羰酰-甘氨酸（BOc-GlyOH）在二环己胺存在下二甲基甲酰胺溶剂中反应生存叔丁氧羰酰-甘-（甲氧基）苯甲酸苯甲酰甲基酯（Ⅳ）。

2·21对一溴甲基苯甲酸苯甲酰甲基酯（Ⅲ）与Boc-GlyOH和二环己胺用量摩尔比为1∶2∶2，反应温度50℃左右，反应后静置。滤除沉淀，滤液减压蒸去溶剂，残余物与乙酸乙酯流。冷却后滤除不溶物，乙酸乙酯溶液依次用10%的柠檬酸水溶液。水、pH9.5的碳酸钾/碳酸氢钠的缓冲溶液洗涤、无水硫酸镁干燥，减压蒸去乙酸乙酯得黄色固体。

2·3 将权利要求2.2所述的生成物（Ⅳ）溶于HAC-H₂O中，加入锌粉反应生成叔丁氧羰酰-甘-4-（甲氧基）苯甲酸（Ⅴ）。

2·31加入锌粉后，室温搅拌、抽滤、滤液倒入无水乙醚中，用盐酸将水相pH值调至0.5-1，剧烈震摇后分出含产物的醚层。水层用乙醚萃取，醚溶液用水洗后减压抽去乙醚，在40-50℃浴温中减压蒸去部分醋酸，残余的醋酸加入苯恒沸除去得黄色固体，充分抽干溶剂，真空干燥。

2·4 将权利要求2·3所述的生成物（Ⅴ）溶于CH₂Cl₂中在二环己基碳二亚胺的存在下与氨丙基硅球作用得

2·41最佳用料摩尔比是叔丁氧羰酰-甘-4（甲氧基）苯甲酰（Ⅴ）∶氨丙基硅球上的自由氨基∶二环己基碳二亚胺＝1∶0.5∶1，反应条件是震荡20小时以上，抽滤，依次用CH₂Cl₃、冰醋酸、CH₂Cl₂洗涤、空气干燥后，真空干燥。

2·5  剩余氨基封闭过程是将权利要求2·4所述的生成物（Ⅳ）与吡啶/乙酸酐（1∶1）混合、反应，将氨基乙酰化，以封闭剩余氨基。

3、根据权利要求2·3所述的载体的制备方法，其特征在于为了净化叔丁氧羰酰-甘-4-（甲氧基）苯甲酸可将其制成叔丁氧羰酰-甘-4-（甲氧基）苯甲酸环己胺盐，用乙酸乙酯重结晶，然后将其悬浮于水中，加入乙醚和等摩尔的盐酸，剧烈震摇后，悬浮物溶解，将水相pH调至1-2，分出醚层，水层用乙醚萃取，合并醚层用水洗涤，无水硫酸镁干燥，蒸去乙醚得净化的叔丁氧羰酰-甘-4-（甲氧基）苯甲酸（Ⅴ）。