[其他]新的脂解酶及其在除垢组合物中的应用

说明书

本发明是关于对脂肪物质可以酶促降解的酶，特别是涉及新的脂解酶。在洗涤的条件下，这类酶具有增强的脂解活性，特别适于作除垢添加剂。本发明还涉及制备这类新脂解酶的方法，作为洗涤组合物添加剂的应用，以及用这些洗涤组合物进行洗涤的方法。此外，本发明还涉及含有这类新脂除酶的除垢组合物。

本发明的酶至少包含多种脂解酶中的一种，它们是由某些微生物，特别是某些细菌产生的，并发现这些脂解酶的理化性质和酶学性质彼此是不相同的。

清洗衣物时的一个特殊问题，是除去油脂性的污斑。若要求低温洗涤，这个问题会更加严重。现今除去油污的方法是在洗涤过程中提高温度和碱性，使其乳化并除去。

现今为了节省能量，越加趋于用较低的洗涤温度，即大约40℃或以下。因此，需要这样的脂酶，这种脂酶在较低的洗涤温度下是有效的，在碱性较高的洗涤溶液中是稳定的，在固体和液体除垢组合物中在贮存状态下是稳定的。

除垢组合物中应用脂解酶虽然已经知道了许多年（例如英国专利说明书No1，442，418第1页第36-38行所提及的），但在实践中看来是相当不令人满意的，因为在洗涤条件下，它们只有很低的清洗效力，并且不能满足现今对稳定性的要求。综述性的文章可参考H.Andree等：应用生物化学杂志（J.Appl.Biochem），2卷，（1980）218-229页，“作为除垢成分的脂酶”

脂解性除垢添加剂也可见于，例如英国专利No.1，293，613及加拿大专利No.835，343.

美国专利No.3，950，277和英国专利No.1，442，418分别公布了与活化剂及钙离子和/或镁离子结合的脂酶，分别用来对脏污的纺织物预浸，并且除掉聚酯纺织物或聚酯-棉混纺物上的甘油三脂污斑和污垢。适用于此处的微生物来源的脂酶（除了动物和植物来源的脂酶）是由假单胞菌属、麦霉菌属、肺炎球菌、葡萄球菌和葡萄球菌毒素，结核杆菌，溶脂酵母和核盘菌属衍生物而来。

英国专利1，372，034公布了一种除垢组合物，该组合物中含有施氏假单胞菌株ATCC1954产生的细菌性脂酶。而且建议最好的脂解酶的较适宜的PH应在6与10之间，在这个范围内应是有活性的，最好PH是在7到9之间。约于1970年，所推定的施氏假单胞菌株重新分类为绿脓杆菌，如同出现在ATCC目录中的那样。

欧洲专利申请EP-A-0130064公布了一种酶促除垢添加剂，其中含有从镰刀菌子孢子体中分离的脂酶，并宣称其溶脂清洗效力比常规的脂酶为高。

由于进行了广泛的研究和实验，惊奇地发现脂酶制剂可由培养适当选择的微生物中获取，在现代洗涤的条件下，这些脂酶能显示有脂酶的活性，亦即在高浓度的除垢剂、高PH值和低洗涤温度的情况下，是稳定和有效的。

因此，本发明提供了新的脂酶制剂，这些脂酶是由属于类产碱假单胞菌，施氏假单胞菌和乙酸钙不动杆菌的一些菌株的培养而获得的。这些脂酶的最适PH大约在8到10.5之间。在洗涤的条件下，在含有除垢剂浓度高达约10g/l的水溶液中，温度在60℃或以下（最好在30-40℃）和PH大约在7到11之间（最好是在大约9到10.5之间），这些脂酶显示有效的脂酶活性。在测定真脂酶单位（TLU）的条件下，最适PH值是在PH恒定仪上测定的，这在本说明书第17页阐述。

按照本发明的最佳实施例，脂酶制剂是在通常的培养条件下，对新分离出的类产碱假单胞菌培养而获得，该菌是从一组内部编号为Sp9，IN    Ⅱ-5，Gr    Ⅵ-15和M-1的菌珠群中选择来的。这些株是1985年8月8日贮存在荷兰巴恩的氟尔-希麦尔培养中心（CBS），编号分别为CBS467.85（7181），CBS468.85（7182），CBS471.85（7185）和CBS473.85（7187）。这些分离菌是用表1所列的表型特征鉴定的。

根据本发明的另一最佳实施例，是在通常的培养条件下，对类产碱假单胞菌亚种Citrulli菌株培养而获得，该菌种储存在ATCC（American    Type    cuture    collection），储存号为ATCC29625。