[其他]利用负股核糖核酸引起植物体细胞的变化

权利要求书

1、一种引起高等植物体细胞变化的方法，本发明的特征在于所述的方法包括下述步骤；

将一段能导致与靶RNA充分互补的负股RNA的转录的DNA顺序导入植物，以使负股RNA有效地结合到靶RNA股以抑制体内靶RNA股的活性。

2、如权利要求1所述的方法，其特征在于所述的靶RNA股为信使RNA，内源性蛋白的表达活性被抑制。

3、如权利要求1所述的方法，其特征在于所述的靶RNA股至少是病原体RNA的一部分。

4、如权利要求3所述的方法，其特征在于所述的靶RNA股是烟草花叶病毒的RNA。

5、如权利要求1所述的方法，其特征在于所述的将DNA顺序导入植物的步骤包括下述步骤;

在细菌中组建一个表达载体质粒，包括一个通常能用于植物细胞的启动区及一段至少部分编码位于启动区3′的靶DNA的DNA顺序，DNA顺序的取向与启动区的正常阅读方向相反;

用来自表达载体质粒的表达载体转化培养的植物细胞，使得转化了的植物细胞转录负RNA股，并且

使转化植物细胞再生，形成整株植物。

6、如权利要求5所述的方法，其特征在于所述的转化步骤包括下述步骤：

用表达载体宿主与A.tumefaciens结合;

选择A.tumefaciens转结合体;并用选择的A.tumefaciens感染植物细胞。

7、一种正常形态的植物，特征在于所述的植物的细胞的基因组含有一段嵌合DNA顺序，该嵌合DNA顺序可导致与靶RNA股充分互补的负RNA股的转录，因而负RNA股将专门与靶RNA股联合从而抑制植物细胞中靶RNA股的活性。

8、如权利要求7所述的植物，其特征在于所述的靶RNA股为一段信使RNA，并且抑制的是植物细胞中内源性基因的表达活性。

9、如权利要求7所述的植物，其特征在于所述的靶RNA股至少为病毒RNA的一部分。

10、如权利要求7所述的植物，其特征在于所述的植物细胞中的嵌合DNA顺序包括：

一个通常可用于植物细胞的启动区;及一段位于启动区的3′处的DNA编码顺序，至少为靶DNA股的一部分编码DNA顺序，其定位与启动区正常阅读方向相反。

11、如权利要求10所述的植物，特征在于所述的嵌合DNA顺序还包括一段可用于植物的、位于转录顺序3′处的聚腺苷酸顺序。

12、权利要求7所述一种植物所产生的种子。

13、权利要求8所述的植物所产生的种子。

14、权利要求9所述的植物所产生的种子。

15、一个可用于植物的嵌合基因的组建过程，其特征在于，所述的组建过程包括：

一般可用于植物细胞的启动区顺序;及

一段位于启动区3′处的DNA编码顺序，至少为植物细胞中有正常活性的靶RNA股的一部分编码，DNA编码顺序的取向与启动区正常转录方向相反，而使嵌合基因致导至少与靶RNA链部分互补的负股RNA的转录，从而抑制植物体内靶RNA股的活性。

16、如权利要求15所述的嵌合基因，其特征在于所述的嵌合基因还包括一段一般可用于植物的位于DNA编码顺序的3′处的聚腺苷酸顺序。