[其他]一族新的灵长类造血生长因子

说明书

本发明涉及一族新的灵长类IL-3样造血生长因子，以及用遗传工程重组技术生产这种造血因子的方法。

红细胞生成素，即造血生长因子，是促进造血细胞生存，生长和分化的蛋白。集落刺激因子（CSFS）是这些造血生长因子的子集，其特征在于能够维持造血细胞集落在体外生长，这些造血细胞起源于骨髓，胎儿肝脏，和其它造血器官的祖先细胞。

某些红细胞生成素的生物化学和生物学鉴定和特性描述受到少量天然存在因素的阻碍，这些因素的来源如血液和尿。最近已经分子克隆了某些这种红细胞生成素，进行异种表达并纯化为均一性。[D.Metcalf，“The    Molecular    Biology    and    Functions    of    the    Granulocyte-Macrophage    Colony    Stimulating    Factors”，Blood，67（2）：257-267（1986）.]其中红细胞生成素是人和鼠的GM-CSF，人的G-CSF，人的CSF-1和鼠的IL-3。已经证明人的GM-CSF[R，Donahue    et.al.，Nature，321：872-875（1986）]，鼠的IL-3[J.Kindler    et    al.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，83：1001-1005（1986）;Metcalfetal.，Blood，68：46-57（1986）]和人的G-CSF[K.Welteet    al.，J.Exp.Med.，165：941-948（1987）]在体内对红细胞生成有效。在此之前已经发现鼠蛋白IL-3在人的系统中没有复制。[D.R.Cohen    et    al.，Nucl.Acids    Res.，14：3641（1986）.]。

本发明提供一族基本上没有其它灵长类蛋白的灵长类IL-3样生长因子，其特征是肽序列相同于或基本相似于下面表Ⅰ和Ⅱ中所示的氨基酸序列。这些序列可用表中所示的DNA序列或能够与多肽杂交和编码具有IL-3样生物学特性的多肽的序列或其它各种各样可证实这种特性的修饰序列所编码。这些多肽也以IL-3样生物学特性为特征。

作为一个实例，本发明提供一种基本上不与其它人的多肽结合的人的多肽，其特征为肽序列与表Ⅱ所示的序列相同或基本相同并至少具有一种IL-3样生物学特性。作为本发明多肽的另一实例的是基本上不与其它灵长类多肽结合的长臂猿多肽，其特征为肽序列与表Ⅰ所示的序列相同或基本相同并至少具有一种IL-3样生物学特性。

本发明多肽的特征在于至少具有一种IL-3样特性，这些特性如下：

a.用还原SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测得表观分子量约为14～35千道尔顿;

b.在标准人骨髓测定中能够以10-100微微克分子的浓度刺激各种谱系的多种类型造血细胞集落的形成;

c.在CML测定中能够以10-100微微克分子的浓度刺激CML细胞增殖;

d.等电点为pH6.0～pH7.6;

e.在Superose    6凝胶过滤柱上43kd处有一个单一的尖峰;

f.在N-聚糖酶处理之后的凝胶上有一个单一的20.5kd的条带;和

g.对用Edman降解法分析N-末端的污染水平不大于2%。

另外，本发明提供含有有效治疗剂量的一种或多种本发明的多肽的药用组合物。这些组合物可用于治疗许多疾病的方法，这些疾病的特点是缺乏造血细胞。按照本发明的这些方法需要给病人服用有效量的至少一种在此所述的多肽。

这样的治疗方法可用于治疗下列疾病，如白细胞减少，血小板减少，贫血，B细胞缺乏，T细胞缺乏，细菌感染和病毒感染，包括在骨髓移殖之后免疫细胞或造血细胞缺乏。本发明的这些方法还可包括与IL-3样多肽同时或相继服用有效量的至少一种其它的红细胞生成素，白细胞介素，或生长因子。作为这种应用的典型的红细胞生成素包括GM-CSF，G-CSF，CSF-1或促红细胞生成素。典型的白细胞介素是IL-1，IL-2，IL-4或IL-6。这些方法也可使用生长因子（如B细胞生长因子），B细胞分化因子，或嗜曙红细胞分化因子。