[发明专利]合成和分离肽的酶膜方法

权利要求书

1、一种酶促合成肽的方法，该方法包括以下步骤：

在含水初始反应混合物中酶促缩合第一种氨基酸化合物和第二种氨基酸化合物以生成一种不带电的化合物；

通过扩散作用将这种不带电的化合物穿过不运载大量的氨基酸化合物的膜运载到含水的第二种反应混合物中；

将运载过的不带电化合物转变成不能穿过膜逆向运载回到初始反应混合物中的形态。

2、根据权利要求1的方法，其中该方法的产物是从下列产物中选出：后脑啡肽、短杆肽菌S、血管紧张素、P物质、受力多生（eledoisin）两栖兰素（caerulein）和亮脑啡肽。

3、一种酶促合成肽的方法，该方法包括以下步骤：

在含水初始反应混合物中将第一种氨基酸化合物和第二种氨基酸化合物酶促缩合，生成一种不带电的化合物;

通过扩散作用将不带电的化合物经过一种不运载大量的氨基酸化合物的膜运载到含水的第二反应混合物中;

将运载的不带电化合物转变成不能逆向穿过膜运载到初始反应混合物中的形态;

移去上述不能逆向穿过膜运载回到初始反应混合物中的化合物。

4、根据权利要求3的方法，该方法还包括从含水的第二反应混合物中分离出与不带电的化合物一起经过膜共渗透进入含水的第二反应混合物中的第一种氨基酸化合物的步骤。

5、根据权利要求3的方法，该方法还包括从含水的第二反应混合物中分离出与不带电的化合物一起经过膜共渗透进入含水的第二反应混合物的第二种氨基酸化合物的步骤。

6、根据权利要求4的方法，该方法还包括把与不带电的化合物一起经过膜共渗透的第一种氨基酸化合物返回到含水初始反应混合物的步骤。

7、根据权利要求5的方法，该方法还包括把与不带电的化合物一起经过膜共渗透的第二种氨基酸化合物返回到含水初始反应混合物的步骤。

8、一种酶促合成肽的方法，该方法包括以下步骤：

带有α-羰酸酯基团的一种N-酰基-β-取代的-L-天冬氨酸和带有α-铵基团的一种苯丙氨酸低级烷基酯，在含有缩合酶的含水反应混合物中缩合，形成N-酰基-L-天冬氨酰-（β-取代的）-L-苯丙氨酸低级烷基酯一种不带电的肽;

通过扩散作用从含水反应混合物中运载不带电的肽穿过离子排斥膜进入产物混合物，

将在产物混合物中的不带电的肽转化成不能逆扩散穿过膜的物质。

9、根据权利要求8的方法，该方法进一步包括从产物混合物中除去不能逆扩散穿过膜的物质的步骤。

10、根据权利要求8的方法，其中缩合酶是在pH值范围约为4.0到9.0中可以形成蛋白酶活性的一种肽。

11、根据权利要求10的方法，其中用一种酯酶通过解离而将不带电的肽转变成一种带电的物质。

12、根据权利要求11的方法，其中酯酶是在pH值约为6.0到9.0范围内起活性作用。

13、根据权利要求11的方法，其中酯酶选自酰化氨基酸水解酶Ⅰ，α-胰凝乳蛋白酶，枯草杆菌蛋白酶A。

14、根据权利要求11的方法，其中酯酶为酰化氨基酸水解酶Ⅰ并且反应混合物的pH约为7.0。

15、根据权利要求10的方法，其中膜包括一种通过在微孔板上细孔中的毛细作用固定的与水不相混溶的有机液体，该有机液体是适用于不带电二肽的一种溶剂。

16、根据权利要求15的方法，其中微孔板是由选自聚四氟乙烯和聚丙烯材料制成并且有机溶剂至少是一种选自正-1-癸醇、正十六醇、正十二醇、N，N-二乙基十二酰胺、十二烷、2-十一烷酮的一种化合物及其混合物。

17、根据权利要求15的方法，其中微孔板包括聚丙烯空心纤维并且溶剂包括N，N-二乙基十二酰胺和十二烷。

18、根据权利要求15的方法，其中膜是一种Bend2-型空心纤维选择性的通透膜。

19、根据权利要求10的方法，其中缩合酶被固定。

20、根据权利要求19的方法，其中缩合酶是嗜热菌蛋白酶，反应混合物的pH值约为7.0。