[其他]人体胰岛素前体转化为人体胰岛素的方法

权利要求书

1、一种使人体胰岛素前体转化为人体胰岛素的方法，这种前体的化学式为：

式中R是氢、用化学的或酶促的方法可切开的氨基酸残基，或者用化学的或酶促的方法可切开的至少含有两个氨基酸残基的肽部分；

R₁是OH、Arg-Y，或Lys-Y，其中Y是OH、氨基酸残基，或者至少含有两个氨基酸残基的肽部分；

从A-1至A-21部分是人体胰岛素A链；从B-1至B-30部分是人体胰岛素A链；从B-1至B-30部分是人体胰岛素B链；以及X是与胰岛素A链上A-1的氨基和胰岛素B链上B-30的羧基相连接的部分，这部分可以被酶促地从A链或B链上切开而且不破坏A链和B链，它包括在水介质中用胰蛋白酶和羧肽酶B处理这种人体胰岛素前体，该水介质含每摩尔人体胰岛素前体约0.1至10摩尔1种或多种具有原子序数21至34、39至52、57至84和89至92的金属离子。

2、根据权利要求1的方法，其中金属离子是选自金属铬、钼、钨、汞、锑、铋、镍、铁、钴、锌、镉、铜、锡、铅、铕、铀、铂和锰的金属离子。

3、根据权利要求2的方法，其中金属离子是选自金属镍、铁、钴、锌、镉、铜、锡、铅、铕、铀、铂或锰的金属离子。

4、根据权利要求3的方法，其中金属离子是选自金属镍、锌、钴和镉的金属离子。

5、根据权利要求1至4之任一项所述方法，其中人体胰岛素前体在水介质中的浓度可高达20毫克分子左右。

6、根据权利要求5的方法，其中人体胰岛素前体在水介质中的浓度约为1毫克分子至3毫克分子。

7、根据权利要求1至6的任一项所述方法，其中金属离子的含量是每摩尔人体胰岛素前体约0.1至2摩尔。

8、根据权利要求7的方法，其中金属离子的含量是每摩尔人体胰岛素前体约0.33至0.6摩尔。

9、根据权利要求1至8的任一项所述方法，其中羧肽酶B含量以重量计，与人体胰岛素前体之比约1∶10至1∶5000。

10、根据权利要求1至9的任一项所述方法，其中胰蛋白酶含量以重量计，与人体胰岛素前体之比约1∶20至1∶250000。

11、根据权利要求1至10的任一项所述方法，其中羧肽酶B对胰蛋白酶的重量比约1∶1至10∶1。

12、根据权利要求1至11的任一项所述方法，其中金属离子是选自金属镍和锌的金属离子。

13、根据权利要求12的方法，其中金属离子是镍离子。

14、根据权利要求1至13的任一项所述方法，其中将选自铍、镁、钙、锶、钡和镭等金属的第二类金属离子加入该混合物中。

15、根据权利要求14的方法，其中第二类金属离子是选自金属钙、钡、锶和镁的一种的金属离子。

16、根据权利要求15的方法，其中第二类金属离子是钙离子。

17、根据权利要求14至16的任一项所述方法，其中第二类金属的含量是每摩尔人体胰岛素前体约0.5至5摩尔。

18、根据权利要求17的方法，其中第二类金属离子的含量是每摩尔人体胰岛素前体约1至3摩尔。

19、根据权利要求1至18之任一项所述方法，其中人体胰岛素前体是胰岛素原。

20、根据权利要求1至19的任一项定义的方法所制备的人体胰岛素。