[发明专利]圆球杆菌的bioA，bioD，bioF，bioC，bioH基因的克隆、载体和转化细胞以及生物素的制备方法

权利要求书

1、为在细菌中的生物素的生物合成链的由下列基因中之一所生产的酶编码的DNA顺序，bioA基因；bioD基因；bioF基因；bioC基因；bioH基因。

2、据权利要求1的DNA顺序，其特征是它为基因bioB和bioD所生产的酶编码。

3、据权利要求1的DNA顺序，其特征是它为基因bioD，bioA和bioB所生产的酶编码。

4、据权利要求1的DNA顺序，其特征是它为基因bioD，bioA，bioB和bioF所生产的酶编码。

5、为在细菌中的生物素的生物合成链的由下列基因中之一所生产的酶编码的DNA顺序，

·bioF和bioC，

·bioF和bioH，

·bioF  bioC和bioH。

6、据权利要求5的DNA顺序，其特征是它还至少为下列基因中之一所生产的酶编码，

·bioA;bioA和bioD。

7、据权利要求5或6中之一的DNA顺序，其特征是它为由基因bioD，bioA和bioB所生产的酶编码。

8、据权利要求1至7中之一的DNA顺序，其特征是它没有天然的顺序，而该顺序是确保在原始细菌中生物素的生物合成方法中的酶的转录控制。

9、DNA顺序，它是在图4至8和图17至19中所述的整个或部分顺序。

10、据权利要求1至9中之一的DNA顺序，其特征是它来源于杆菌菌株（Souche）。

11、据权利要求10的DNA顺序，其特征是它来源于球杆菌菌株。

12、至少包含一个据权利要求1至11的顺序的质粒载体。

13、据权利要求12的载体，其特征它是包含能整合到宿主菌株的染色体中的DNA顺序。

14、据权利要求13的载体涮卣魉辽侔桓龃嬖谟谝木甑幕蜃橹械模⒛芙姓献饔玫乃承虻耐此承颉?

15、据权利要求14的载体，其特征该同源顺序是天然的基因组的顺序。

16、据权利要求14的载体，其特征该同源顺序是一个依靠整合的质粒载体而已被整合到基因组中的顺序。

17、据权利要求16的载体，其特征是该特定的质粒载体至少包含一个防抗生素的基因和一个从属于欲转化的菌株的启动子的基因标志物。

18、据权利要求17的载体，其特征是该启动子是诱导启动子。

19、据权利要求18的载体，其特征是该整合的质粒载体是质粒PTG475。

20、据权利要求12的载体，其特征是它包含自主复制的起源（Origine）。

21、据权利要求20的载体，其特征是它是一个杆菌菌株，或是大肠埃希氏菌菌株的自主复制起源。

22、据权利要求20或21中之一的载体，其特征是为生物素的生物合成链的酶密码的DNA顺序是伴陪有能在宿主菌株中表达的成分（element）。

23、据权利要求22的载体，其特征是在这些能表达的成分中包括了在宿主菌株中有效的启动子和终止密码子。

24、被据权利要求12至23中之一的载体所转化的细胞。

25、据权利要求24的细胞，其特征它是选自杆菌属，埃希氏菌属或假单胞菌属的细菌。

26、据权利要求24的细胞，其特征它是酵母菌属的酵母。

27、据权利要求25的细胞，其特征它是选自球杆菌，枯草杆菌和大肠埃希氏杆菌。

28、据权利要求24至27中之一的细胞，其特征该转化细胞是生产生物素或其同效维生素的细胞。

29、制备生物素的方法，其特征把至少含有庚二酸或该生物素的同效维生素的培养基用据权利要求24至28中之一的，并能接受庚二酸或所说的同效维生素影响的细胞进行发酵，并由此回收所生成的生物素。