[其他]由重组体棒状病毒感染的昆虫细胞中的人类免疫缺陷病毒的壳膜基因得到的多肽无效
申请号: | 87107837 | 申请日: | 1987-10-16 |
公开(公告)号: | CN87107837A | 公开(公告)日: | 1988-12-21 |
发明(设计)人: | 马克·艾·科克伦;盖尔·埃·史密斯;富兰克林·沃尔沃维斯 | 申请(专利权)人: | 微基因系统公司 |
主分类号: | C12N15/00 | 分类号: | C12N15/00;C12P21/02;G01N33/569 |
代理公司: | 中国专利代理有限公司 | 代理人: | 杨九昌 |
地址: | 美国康*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 重组 体棒状 病毒感染 昆虫 细胞 中的 人类 免疫 缺陷 病毒 基因 得到 多肽 | ||
1、一种检测爱滋病病毒抗体的方法,其包括使所说的爱滋病病毒抗体与由重组体昆虫病毒表达的爱滋病env蛋白接触,并检测所说的爱滋病病毒抗体与所说的蛋白之间的固定或反应。
2、根据权利要求1的方法,其中所说的爱滋病病毒env蛋白是被标记了的,以便于检测所说的蛋白与所说的爱滋病病毒抗体的固定或反应。
3、一种生产受滋病病毒env蛋白的方法,其包括将爱滋病病毒env蛋白基因或爱滋病病毒壳膜基因(env)插入到昆虫病毒的DNA中,用所得到的重组体病毒感染昆虫细胞或昆虫,并培养所得感染的昆虫或昆虫细胞,以表达或产生爱滋病病毒env蛋白。
4、根据权利要求3的方法,其中所说的昆虫病毒是一种棒状病毒。
5、一种构建能在宿主昆虫细胞内表达选择的爱滋病病毒基因或其蛋白的重组体棒状病毒表达载体的方法,包括
(a).通过将棒状病毒基因组的一部分插入克隆体内,之后将选择的爱滋病病毒基因或其部分插入到该修饰过的插入载体内以制得重组体插入载体,从而使经选择的爱滋病病毒基因或其部分在棒状病毒启动子的控制下被表达;
(b).通过将上述经修饰的插入载体与棒状病毒DNA混合,将上述经修饰的爱滋病病毒基因或其部分转入棒状病毒表达载体内,转染适当的昆虫细胞,并分离含有选择的爱滋病基因或其部分的重组体病毒。
6、根据权利要求5的方法,其中选择的爱滋病病毒基因或其部分是env基因或其部分。
7、根据权利要求5的方法,其中选择的爱滋病病毒基因或其部分是gag基因或其部分。
8、根据权利要求5的方法,其中选择的爱滋病病毒基因或其部分是Pol基因或其部分。
9、根据权利要求5的方法,其中棒状病毒启动子是多角体基因启动子。
10、根据权利要求5的方法,其中棒状病毒是Autographa Californica核多角体病毒。
11、根据权利要求6的方法,其中来自爱滋病env基因的选择的爱滋病病毒基因或其部分是在参照附图所描述和图解说明的插入载体A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、K、L、A-1或B-1中。
12、一种含成选择的爱滋病病毒多肽的方法,其包括用重组体棒状病毒载体感染敏感的宿主昆虫细胞-其中棒状病毒载体含有一个或多个爱滋病病毒蛋白基因或其部分,并培养感染的细胞以表达爱滋病病毒多肽。
13、根据权利要求12的方法,其中敏感的昆虫细胞为衍生目昆虫Spodoptera frugiperda。
14、根据权利要求12的方法,其中爱滋病基因或其部分是env基因或其部分。
15、根据权利要求12的方法,其中爱滋病基因或其部分是gag基因或其部分。
16、根据权利要求12的方法,其中爱滋病基因或其部分是Pol基因或其部分。
17、根据权利要求12的方法,其中爱滋病病毒基因或其部分是在棒状病毒启动子的控制下被表达的。
18、根据权利要求17的方法,其中棒状病毒启动子是多角体基因启动子。
19、根据权利要求12的方法,其中棒状病毒是Autographa Californica核多角体病毒。
20、根据权利要求12的方法,其中选择的爱滋病病毒蛋白基因或其部分是来自于爱滋病env基因,并在参照附图描述和图解说明的插入载体A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、K、L、A-1或B-1中。
21、一种纯化爱滋病env基因多肽的方法,包括使所说的多肽通过小扁豆凝集素亲合层折柱以分离糖蛋白,之后使用分子筛层折按分子量大小分离糖蛋白。
22、根据权利要求21的方法,其中爱滋病env基因多肽是依照权利要求20生产的。
23、一种检测和测定人类爱滋病的方法,包括使所说的抗体与由重组体昆虫病毒表达的重组体爱滋病病毒蛋白的接触。
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