[其他]在大肠杆菌内表达的人类脱辅基脂蛋AI及其变异形式

权利要求书

1、能够在已转化的宿主内表达蛋白质的表达载体，所说的蛋白质能够使用抗人apoAI抗血清以ELISA法检测，并且具有下列式(1)的结构通式

Met-X-Y  (1)

其中X是键、包括得自β半乳糖苷酶N末端氨基酸残基之序列或包括蛋白A的一个或多个IgG结合区域之序列的载体肽序列、或人apoAI的前导序列；且y代表人apoAI或其遗传变异型的序列。

2、根据权利要求1的表达载体，其中所说的蛋白质是Met-apoAⅠ、Met-apoAⅠ-T6、Met-apoAⅠ-MⅠ或Met-apoAⅠ-T6/MⅠ。

3、根据权利要求2的表达载体，其得自于质粒pFCE4+。

4、根据权利要求3的表达载体，其为质粒pML11-20、pIL8-6、pIL8-Ⅰ或pIL8-6Ⅰ。

5、根据权利要求1的表达载体，其中载体肽序列包括一得自β半乳糖苷酶的多至前15个N末端氨基酸残基的序列。

6、根据权利要求5的表达载体，其中载体肽包括序列Thr-Met-Ile-Thr-Pro-Ser-Phe-Asp-Gly-Ser-Met或Thr-Met-Ile-Thr-Asn-Ser-Arg-Gly-Ser-Met。

7、根据权利要求6的表达载体，其得自于质粒pUC8或pUC9。

8、根据权利要求7的表达载体，其为质粒pIPI、pIPI-6、pIPI-Ⅰ、pIPI-6Ⅰ、pRP5、pRP5-6、pRP5-Ⅰ或pRP5-6Ⅰ。

9、根据权利要求1的表达载体，其中载体肽包括葡萄球菌蛋白A或其残基23至270。

10、根据权利要求1的表达载体，其中载体肽序列包括蛋白A的一个或多个IgG结合区域，所说的结合区域是通过蛋白水解酶的识别序列与人apoAⅠ或其遗传变异型相融合的。

11、根据权利要求10的表达载体，其中载体肽是由（λ噬菌体之CRO蛋白的前11个氨基酸）-（葡萄球菌蛋白A的248个氨基酸（残基23至270））-（Pro-Gly-Asp-Ser-Thr）-（β半乳糖苷酶的后17个氨基酸）-（含有蛋白水解酶肠激酶之识别序列的17个氨基酸即Gly-Asp-Pro-Glu-Phe-Val-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-Ser-Ser-Arg-Gly-Ser-Met）所组成的。

12、根据权利要求1的表达载体，其中载体肽序列包括蛋白A的一个或多个IgG结合区域，而且它是自质粒pLM3衍生得到的。

13、根据权利要求12的表达载体，其为质粒pLM8。

14、根据权利要求1的表达载体，其中人apoAⅠ的前导序列是与人apoAⅠ或其遗传变异型的序列融合的，并且是由质粒pDS20衍生得到的。

15、根据权利要求14的表达载体，其为质粒pFC33。

16、已用上述权利要求之任一项中所限定的表达载体转化的宿主，并从而能够在其中表达如权利要求1中所限定的式（1）的蛋白质。

17、根据权利要求16的宿主，其中宿主是大肠杆菌的菌株。

18、生产能够使用抗人apoAⅠ抗血清以ELISA法检测的蛋白质的方法，该方法包括培养如权利要求16或17中限定的已经转化的宿主并回收如此得到的所说的蛋白质。