[其他]在大肠杆菌内表达的人类脱辅基脂蛋AI及其变异形式

说明书

本发明涉及用DNA重组技术生产人类脱辅基脂蛋白AI（apoAI）及其变异型。

动脉粥样硬化及其并发症（即冠心病）可能是世界上最严重的健康问题。已发现大量与疾病发展相关的危险因素、其中最重要的是高血浆胆固醇（CHL）水平。因而，已对人体内CHL代谢的研究作了大量工作。

脂蛋白运输系统把握着了解基因、饮食和激素相互作用以调节人体内血浆CHL及甘油三酯（TG）水平之机制的关键。血浆中脂蛋白的功能主要是将脂类由一个器官输送到另一器官。近年已经知道，它们不仅溶解疏水脂类，而且也可指定各不同类脂质所释放达到的身体部位。脂蛋白主要有四类：乳糜微粒（CM）、极低密度脂蛋白（VLDL）、低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL）。

为便于在血浆中运输，TG和胆固醇酯（LHLE）被包裹在脂蛋白颗粒中，在其中形成一个由极性磷脂（PL）的表面单层包绕的疏水核心。表面外壳还含有相对小量的未酯化CHL以及称为脱辅基脂蛋白（apo）的蛋白质。已鉴定出至少九种apo：AⅠ、AⅡ、AⅣ、B（48-100）、CⅠ、CⅡ、CⅢ、D和E。

特别引人关注的是有关血浆脂蛋白水平与冠血病（CHD）发展的危险性之间关系的研究。HDL和LDL均为CHL和CHLH的载体，但已证明LDL-CHL水平是正危险因素（Kannel等，Ann.Intern.Med.，90：85-91，1979），而HDL则是重要的负危险因子（Yaari等，Lancet，1：1011-1015，1981）。虽然有关这些脂蛋白的确切功能及作用方式尚不完全明瞭，但显然HDL可通过称为反向CHL运输（RCT）的机制特定地用于由外周组织中除去CHL并将其回输到肝脏内。

HDL的主要脱辅基脂蛋白是apoAⅠ，一些研究表明，血浆apoAⅠ水平与CHD之间反相关相似于文献中提到的HDL-CHL水平与CHD之间的反相关（Iskikawa等，Eur.J.Clin.Invest.，8：172-182，1978）。此外，HDL-CHL和apoAⅠ水平与血管造影可证明的冠状动脉硬化损害的严重程度反相关（Pearson等，Amer.J.Epidem.，109：285-295，1979;Maciejko等，New    Eng.J.Med.，309：385-389，1983）。由此可以认为，血浆中高浓度HDL影响CHD是通过延迟动脉粥样硬化形成和/或促进已有损伤的消退得以证实的。

HDL脱辅基脂蛋白（主要是apoAⅠ）与卵磷脂的复合物在体外促进游离CHL由细胞（包括培养的动脉平滑肌细胞）内流出（Stein等，Biochem.Biophys.Acta，380：106-118，1975）。给带有实验性动脉粥样硬化的动物静脉内灌注磷脂，可有利地影响这种流出过程（Adams等，J.Path.Bact.，94：77-87，1968），并使apoAⅠ/卵磷脂复合物以相似于天然HDL颗粒的速率由血浆中排除（Malmendier等，Clin.Chem.Acta，131：201-210，1983）。

给饲以CHL的兔静脉内输注apoAⅠ可使动脉损伤的面积减少50%。这表明apoAⅠ具有防止动脉硬化性损伤形成的作用，且可能是通过增加动脉壁对CHL的摄入达到的（Maclejko和Mao，Artheriosclerosis，2：407a，1982;Mao等，Fed.Proc.（USA），42，no7 pABSTRACT357，1983;Badimon等，Cardiovascular Disease¹86，1986ABSTRACT81）。