[其他]免疫球蛋白结合物

说明书

本发明涉及免疫球蛋白结合物及其制备和使用。

已经知道使用单克隆抗体（MoAb）治疗肿瘤的目标抗肿瘤剂的一般概念，其治疗意义正在给予评价。一般研究涉及生产能对肿瘤细胞进行选择性定位和杀伤的抗体和毒性试剂的结合物。主要注意力集中于使一系列植物和细菌毒素与抗体结合而构建免疫毒素，这样，它们与抗原的结合和内化则导致细胞死亡。实际上，许多被认为是特异于肿瘤的MoAb与正常细胞的亚群也发生反应，从而使正常组织受到潜在的伤害，因此，使用这种强力毒素可能是不现实的。一种比植物毒素更安全的方法是使常规的抗肿瘤药物（如doxorubicin、Vindesine、Chlorambucil、Melphalan和Methotrexate）与抗体偶联。由于目前所用抗肿瘤剂的非特异的毒性效应，一直企图通过使它们与肿瘤抗原的MoAb偶联而提高其治疗指数。

为了抑制胸腺来源的T细胞对于移植的排斥反应，所作努力通常集中于使用抗胸腺细胞球蛋白以降低T细胞活性。最近，随着单克隆抗体的发展，已有可能根据其离体功能和由MoAb确定其特异的表面抗原的存在而确定T细胞亚群。这刺激了对于T细胞的移植排斥的控制机理的探索，通过L3T4和Ly-2鼠抗原进行定义，将主要组成部分集中于辅助细胞/诱导细胞和细胞毒性的/抑制细胞几个亚群。虽然OKT3    MoAb（一种抗pan    T细胞试剂）已证明具有活体效应，但我们在最近的研究中发现，抗20种不同鼠淋巴细胞抗原的20种MoAb在小鼠中没有活体的效应，因此不能用于活体研究。因此应当寻找一种方法，使这些高度特异性的MoAb能够具有更强的效力并完全去除其靶细胞。利用具细胞毒性的药物与MoAb偶联即是这样一种研究。

药物-MoAb结合物的临床潜力包括对癌证进行免疫化疗，缓解各种免疫调控失常和异源移植的排斥反应。许多研究表明，毒素和药物当与肿瘤相关抗原刺激的MoAb偶联后，对肿瘤细胞具有特异的细胞毒性。但是，虽然毒素-抗体结合物已被大量用来在离体中在骨髓移植之前根除T细胞，但对于在活体中使用药物-MoAb结合物以根除T细胞和研究T细胞在移植排斥中的免疫调控作用没有给予足够的重视。

Anthracycline类是用于癌症化疗的一组重要的抗肿瘤剂，其中的doxorubicin和daunorubicin已证明对于固体肿瘤具有效力。但是，使daunorubicin和doxorubicin与抗体偶联时，如果偶联是通过氨基进行的则导致大部分药物活性的丧失。最近，利用bromodaunorubicin通过碳原子14已使daunorubicin与几种MoAb偶联。这些结合物表现出离体活性。但没有活体研究的报道（Gallego    et    al，Int.J.Cancer    1984    33：373-744）。而且还发现;daunorubicin-MoAb结合物在浓度大于10μg/ml时表现出非特异的毒性。

现在我们正发现，Idarubicin（4-脱甲氧基的daunorbicin，Ida）可与MoAb偶联，而且结合物在离体和活体中具有选择性的强力的抗肿瘤活性。Ida-MoAb结合物在活体中当剂量小于8.0mg/kg没有明显的非特异毒性。Ida-MoAb结合物比daunorubicin-MoAb结合物具有更大的离体和活体效应。

进一步，我们通过使Ida和已知与不同的淋巴细胞亚群（L3T4⁺、Ly-2⁺和Thy-1⁺）反应的MoAb偶联，评价了Ida-MoAb结合物特异性根除细胞的能力。我们已发现这是一种极为有效的排除细胞的方法。例如，抗Ly-2.1的MoAb在活体中测不到对于Ly-2.1⁺细胞的效应，但与细胞毒性剂Ida偶联后能变成一种有效的细胞毒性剂。

利用抗Ly-2和L3T4抗原的MoAb，我们已经证实Ida-MoAb能够在离体和活体中除去靶细胞。能够提供这样的Ida-MoAb结合物，它们比之抗淋巴细胞球蛋白或抗pan    T细胞的试剂如OKT3    MoAb，具有更大的潜力以去除与移植排斥有关的特异的T细胞亚群。

因此，本发明提供了含有与单克隆抗体或其片段（至少包括抗体中的一个抗原结合位点）结合的Ida的免疫球蛋白结合物。