[发明专利]酸性蛋白酶的纯化方法无效
申请号: | 88103705.2 | 申请日: | 1988-06-20 |
公开(公告)号: | CN1031394A | 公开(公告)日: | 1989-03-01 |
发明(设计)人: | 仓本建征;阿川民生;岸本胜光 | 申请(专利权)人: | 武田药品工业株式会社 |
主分类号: | C12N9/50 | 分类号: | C12N9/50;C07K3/22 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利代理部 | 代理人: | 李瑛 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 酸性 蛋白酶 纯化 方法 | ||
1、一种纯化酸性蛋白酶的方法,该方法包括使用基本上无盐的水,将基本上无盐的酸性蛋白酶水溶液与弱碱性离子交换树脂接触,并用含有无机盐的水溶液洗脱吸附上的酸性蛋白酶。
2、按照权利要求1所述的方法,其中酸性蛋白酶为赛氏肽酶。
3、按照权利要求1所述的方法,其中通过在培养基中培养赛氏杆菌属的赛氏肽酶产生菌株并从所得培养肉汤中分离出细菌细胞制得酸性蛋白酶水溶液。
4、按照权利要求3所述的方法,其中用微量过滤法,超滤法或陶瓷过滤法进行细菌细胞的分离。
5、按照权利要求1所述的方法,其中酸性蛋白酶水溶液含有浓度为0.01~10%(w/v)的赛氏肽酶。
6、按照权利要求1所述的方法,其中酸性蛋白酶水溶液含有浓度为不超过0.1%(w/v)的盐。
7、按照权利要求1所述的方法,其中弱碱性离子交换树脂是基于乙烯基聚合物,苯乙烯聚合物,丙烯酸聚合物或DEAE-纤维素的弱碱性离子交换树脂,该树脂带有弱碱性基团。
8、按照权利要求7所述的方法,其中弱碱性离子交换树脂可以直径为0.3~3.0mm的珠粒形式使用。
9、按照权利要求1所述的方法,其中基本上无盐的水含有浓度不高于0.01%(w/v)的盐。
10、按照权利要求1所述的方法,其中水溶液含有浓度为1~10%(w/v)的无机盐并没有有机溶剂。
11、按照权利要求1的方法,其中吸附过程是逐柱或逐批进行的。
12、按照权利要求11所述的方法,其中逐柱吸附是以0.05~20的空速进行。
13、一种纯化酸性蛋白酶的方法,该方法包括在培养基中培养酸性蛋白酶产生菌株,从培养肉汤中分离出细菌细胞,利用基本上无盐的水,将所得的基本上无盐的酸性蛋白酶水溶液与弱碱性离子交换树脂接触并用含有无机盐的水溶液洗脱吸附上的酸性蛋白酶。
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