[发明专利]分离大环非对映体的一种方法

说明书

本发明涉及分离化学式为Ia和Ib

的两个大环非对映体（3S，7R）和（3S，7S）-3，4，5，6，7，8，9，10，11，12-十氢-7，14，16-三羟基-3-甲基-1H-2-苯并氮杂环十四烯-1-酮的一种方法，该法是以含50-60%非对映体Ia的混合物作原料，在有控制的冷却条件下于含水乙腈中进行结晶。

众所周知，两个非对映体Ia与Ib中，只有Ia（α-玉米赤霉醇形式）具有高的组成代谢活性而无副作用（美国专利4069339号;E.Maissoner和J.M.vigneron编“家畜饲养中的组成代谢”，OIE会议集，巴黎，1983年）。滴定率高于98.5%的化合物Ia是一种极有用的率品，尤其是用于养牛业中（美国专利4069339号）。

化合物Ia与Ib的混合物是作为一个生物工艺多步过程的最终产物而制得的。在该过程中用禾木科镰孢菌（Fusarium        Graminearum）对玉米进行发酵，接着进行化学转变，得到不饱和酮Ⅱ（玉米赤霉烯酮）。

将该大环酮氢化，从而使酮羰基和CH＝CH键都被还原。众所周知，还原可以按催化方式进行（美国专利3239345号;德国专利公开说明书2111606、2253467、2328605号），也可以使用化学计量数量的复合氢化物来完成（美国专利3704294（1972），意大利专利1175147号，G.Shatzke等，Helv.Chim。Acta.1986年69卷734-748页）。虽然后一种方法对非对映体的选择性较高，即Ia形式（α-）的含量较高，但是从费用角度考虑，无疑更倾向于有损非对映体选择性的催化还原法，例如用阮内镍（niekel        Raney）还原。在这种情况下，还原产物中Ia的数量为50至60%。因此，将Ia与Ib分离开和非对映体Ib的再利用就成为使整个过程工业化的关键。

迄今为止，两种非对映体Ia与Ib的分离是用两种完全不同的方法进行的。头一种方法是将Ia、Ib的混合物用羧酸-硫酸酰化，回收两个6′-0-酰基-非对映体（α-与β-形式）的混合物，利用反复重结晶由此混合物中分离出α-6′-0-酰基异构体。最后，将α-6′-O-酰基异构体水解，所得产物进行重结晶（美国专利3687982号），得到化合物Ia。第二个方法披露在以本申请人名义申请的意大利专利申请83329A/85号，其要点是用高效液体色谱进行工业规模的色谱分离。与前面所说的方法相比，虽然此法的设备容易控制并可节省人力，但其起始投资高得多。

本发明的方法与迄今为止的这些方法相比，在设备与费用方面有显著的优越性。

事实上已经发现，发酵得到的玉米赤霉烯酮氢化后的Ia、Ib混合物，或玉米赤霉酮，其Ia（α-玉米赤霉醇）滴定率为50-60%，可以用乙腈/水混合物作为结晶溶剂进行选择性结晶。

溶剂混合物中的水百分含量可以从0.1至10%，最好是从0.2至2%。溶质/溶剂比可以从1∶10至1∶30;特别推荐的比例是从1∶20至1∶22。

本发明的方法在于，将Ia、Ib混合物在含水乙腈中加热回流，接着在连续搅拌下有控制地冷却（大约每小时5至10℃）至最终温度为15至35℃。

结晶出的Ia的滴定率高于90%，按Ia总量计产率为70-75%。按常规步骤进行的第二次结晶得到滴定率高于98.5%的非对映体Ia。

第二次结晶最好在溶剂-溶质比为25至35∶1的条件下进行，在28至30∶1之间更好。

下面的表1列出了用不同的乙腈/水比进行结晶试验的结果。这些数据清楚地说明了水含量从0.2至2%时有最佳的选择性和产率。

表1        自乙腈/水中结晶的Ia的滴定率与产率变化（最终温度30℃）

下面的表2表明最终温度和溶质/溶剂比如何影响产率与非对映体选择性。显然，比值在1∶20至1∶22范围时所得结果最好，而当最终温度下降时，产率增加，但选择性变差。

表2.Ia滴定率和产率随稀释度与最终温度的变化

（溶剂∶乙腈/水99.8∶0.2;起始混合物Ia∶Ib＝54∶46）