[发明专利]合成杀虫的晶状蛋白质基因

权利要求书

1.一种产生杀虫蛋白质的方法，其特征在于，它包括步骤：

(a)将异源的合成DNA顺序引入宿主植物细胞，该合成DNA顺序衍生自编码杀虫蛋白质的苏云金芽孢杆菌基因，其中该杆菌基因的DNA编码顺序已被修饰以产生该合成DNA顺序，从而使该合成DNA顺序的密码子使用频率更接近于该植物细胞的天然基因的密码子使用频率；以及

(b)在使该合成DNA顺序在该植物细胞或其子代中表达的条件下，维持含有合成DNA顺序的该植物细胞或其子代。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，该合成DNA顺序编码一蛋白质，该蛋白质与衍生出它的苏云金芽孢杆菌基因所编码的蛋白质在功能上相当。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，该合成DNA顺序编码一氨基酸顺序，该氨基酸顺序与衍生出它的苏云金芽孢杆菌基因所编码的氨基酸顺序同源。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，该合成DNA顺序的CG和TA二联体空缺指数，与衍生出该合成DNA的苏云金芽孢杆菌基因的CG和TA二联体空缺指数相比，更接近植物细胞的空缺指数。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，该合成DNA顺序来自这样的修饰：即将CUUCGG发夹(环)从苏云金芽孢杆菌基因的DNA顺序中删除。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，该合成DNA顺序来自这样的修饰：即将植物多聚腺苷酸化信号区从苏云金芽孢杆菌基因的DNA顺序中删除。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，该合成DNA顺序来自这样的修饰：即将聚合酶II终止顺序从苏云金芽孢杆菌基因的DNA顺序中删除。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，该合成DNA顺序来自这样的修饰：即将植物一致剪接位点从苏云金芽孢杆菌基因的DNA顺序中删除。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，该合成DNA顺序来自这样的修饰：对苏云金芽孢杆菌基因的DNA顺序的进行修饰以产生在该合成DNA顺序编码区域的5′端含有植物翻译和起始顺序的顺序。

10.如权利要求6所述的方法，其特征在于，该植物多聚腺苷酸化信号区选自下组：AATAAA、AATGAA、AATAAT、AATATT、GATAAA、和AATAAG。

11.如权利要求7所述的方法，其特征在于，该聚合酶II终止顺序是CAN_7-9AGTNNAA。

12.如权利要求8所述的方法，其特征在于，该植物一致剪接位点选自下组：5′＝AAG：GTAAGT和3′＝TTTT(Pu)TTT(Pu)T(Pu)T(Pu)T(Pu)TGCAG：C。

13.如权利要求1所述的方法，其特征在于，该合成DNA顺序的A+T碱基含量低于60％。

14.如权利要求1所述的方法，其特征在于，对苏云金芽孢杆菌基因的DNA顺序的修饰包括替换至少一个核苷酸。

15.一种产生杀虫蛋白质的方法，其特征在于，它包括步骤：

(a)将异源的合成DNA顺序引入宿主植物细胞，该合成DNA顺序衍生自编码杀虫蛋白质的苏云金芽孢杆菌基因，其中苏云金芽孢杆菌基因的DNA编码顺序已被修饰以产生该合成DNA顺序，从而使该合成DNA顺序含有更多数目的、被该植物细胞优选而不是被苏云金芽孢杆菌基因所优选的密码子；以及

(b)在使该合成DNA顺序在该植物细胞或其子代中表达的条件下，维持含有合成DNA顺序的该植物细胞或其子代。

16.如权利要求15所述的方法，其特征在于，该合成DNA顺序编码一蛋白质，该蛋白质与衍生出它的苏云金芽孢杆菌基因所编码的蛋白质在功能上相当。

17.如权利要求15所述的方法，其特征在于，该合成DNA顺序编码一氨基酸顺序，该氨基酸顺序与衍生出它的苏云金芽孢杆菌基因所编码的氨基酸顺序同源。

18.如权利要求15所述的方法，其特征在于，该合成DNA顺序的CG和TA二联体空缺指数，与衍生出该合成DNA的苏云金芽孢杆菌基因的CG和TA二联体空缺指数相比，更接近植物细胞的空缺指数。