[发明专利]微生物发酵法生产青霉素酰化酶

权利要求书

1、一种利用微生物发酵生产青霉素酰化酶的方法，该方法包括菌种的诱变、发酵、酶的分离提纯步骤，其特征在于：

(1)以筛选的巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)46-1为出发菌株进行反复诱变处理，得到保藏登记号为CGMCC No 0145的产胞外青霉素酰化酶的高产菌株巨大芽孢杆菌，

(2)将种子培养液接入含1.0%葡萄糖，1.5%蛋白胨，0.3-0.9%酵母膏，0.1-1.1%苯乙酸的发酵培养基中，发酵起始pH为6.5-8.5，在28℃±1℃摇床培养30-72小时，摇床速度为180-200rmp，

(3)用硅藻土或氧化铝吸附，硫酸铵水溶液洗脱，超过滤浓缩脱盐提纯青霉素酰化酶。

2、根据权利要求1所述的方法，其特征在于菌种分离时培养基中不加青霉素酰化酶的诱导剂苯乙酸。

3、根据权利要求1所述的方法，其特征在于菌种诱变方法包括用物理和化学因子反复处理，处理中选取高酶活的单菌落，这些处理因子包括紫外线、亚硝基胍、氯霉素、氯化锂。

4、根据权利要求1所述的方法，其特征在于发酵培养基中酵母膏为0.4-0.6%，苯乙酸为0.6-0.9%。

5、根据权利要求1所述的方法，其特征在于苯乙酸在发酵开始0-14小时加入。

6、根据权利要求1所述的方法，其特征在于发酵时间在40-45小时。