[发明专利]WS7622A、B、C和D物质及其衍生物、制备方法及应用

说明书

本发明涉及新的WS7622A、B、C和D物质及其衍生物。

更具体地说，本发明涉及具有抑制人类白细胞弹性蛋白酶活性的新的WS7622A、B、C和D物质、其衍生物及其可药用的盐，它们的制备方法和含有它们的药物组合物及其使用方法。

在营养培养基中培养产生WS7622A、B、C和D物质的链霉菌属（Streptomyces）菌株，即可生产WS7622A、B、C和D物质。

微生物

可用来生产WS7622A、B、C和D物质的微生物是一种产生WS7622A、B、C和D物质的菌株，它属于链霉菌属，其中拒霉素链霉菌（Streptomyces        resistomycificus）7622已新近从采自日本福岛县广野区的土样中分离出来。

新近分离的拒霉素链霉菌7622的冻干样品按照《布达佩斯条约》首次保藏在国际性保藏机构工业科技署发酵研究所（日本305，茨城县筑波市东1区1-3号），其登记号为FERM        BP-2306（保藏日：1989年2月23日），称为链霉菌第7622号种，因此此菌株被称为拒霉素链霉菌7622。

应该理解，新的WS7622A、B、C和D物质的生产并不仅限于使用此处所述的特定微生物，该微生物仅仅用于举例说明。本发明还包括使用能够产生WS7622A、B、C和D物质的任何突变株，包括天然突变株和人工突变株，人工突变株可以由所述菌株通过常规手段得到，这些手段有例如X光照射、紫外辐射、用N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍和2-氨基嘌呤处理等。

拒霉素链霉菌7622具有下列形态学、培养、生物学和生理学特征。

（1）形态特征：

应用Shirling和Gottlieb^1）所述的方法进行这项分类研究。

用光学显微镜和电子显微镜对在燕麦粉琼脂、酵母膏-麦芽汁琼脂和无机盐-淀粉琼脂上于30℃下培养14天的培养物进行形态观察。

营养菌丝体发育良好，没有断裂现象。气生菌丝体总状分枝而形成螺旋状孢子链和易曲竖直孢子链，每链有30多个孢子。孢子表面光滑且为卵形，大小为0.7-0.9×0.8-1.1μm。未观察到硬颗粒、孢子囊和游动孢子。

（2）培养特征：

在Shirling和Gottlieb（前面已提到）及Waksman^2）所述的10种培养基上观察培养特征。

培养过程在30℃下进行21天。本研究中所用的颜色名称取自Methuen颜色手册（Handbook of Colour^3））。结果示于表1。

表1        7622号菌株的培养特征

培养基        培养特征

酵母膏-麦芽汁琼脂        G：良好

A：中等，蓝灰色（22E2）

R：褐色（6F4）

S：无

燕麦粉琼脂        G：良好

A：中等，蓝灰色（22D2）

R：褐色（6F6）

S：无

无机盐-淀粉琼脂        G：良好

A：丰富，褐灰色（7E2）

R：紫褐色（11F6）

S：无

甘油-天冬酰胺琼脂        G：良好

A：丰富，褐灰色（6E2）

R：灰橙色（5B5）

S：无

蛋白胨-酵母膏-铁琼脂        G：中等

A：无

R：褐色（6F6）

S：深褐色

酪氨酸琼脂        G：良好

A：差，青绿灰色（24E2）

R：深褐色（7F8）

S：无

葡萄糖-天冬酰胺琼脂        G：中等

A：无

R：黄白色（4A2）

S：无

营养琼脂        G：差

A：无

R：黄白色（4A2）

S：无

本奈特琼脂        G：良好

A：差，蓝灰色（22E3）

R：褐橙色（5C5）

S：无

蔗糖-硝酸盐琼脂        G：良好

A：无

R：灰洋红色（13D4）

S：无

缩写：G＝生长;A＝气生菌丝体;

R＝反面颜色;S＝可溶性色素。