[发明专利]应用Ⅱ型糖苷内切酶的方法及配制剂

说明书

本发明涉及应用单独的II型糖苷内切酶或其与其他酶和(或)洗涤剂的组合物进行处理，以从表面上除掉含糖苷物质如糖蛋白的方法及配制剂。

在洗涤剂配方技术领域中，将酶与各种洗涤剂合用以除掉包含蛋白质和(或)糖类的污染物已为公知。这类酶配方制剂是设计用于从软表面如布和从硬表面如瓷和金属上除掉各类型污染物。据报道，例如蛋白酶类如胰蛋白酶、胰酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶已用于洗涤剂配方中以除去蛋白质类污染物并获得不同程度的成效。另方面，特定的糖苷酶如纤维素酶、溶菌酶、淀粉酶、葡聚糖酶已与不同洗涤剂配制成剂，用于除去某些糖类污染物。另有洗涤剂配方是蛋白酶与糖苷酶合用于污染物处理。

用于洗涤剂配方的一些糖苷酶如β-淀粉酶、α-半乳糖苷酶及β-半乳糖苷酶都是糖苷外切酶，它们从一个低聚糖或聚糖上分裂出一个或多个端残基。其他糖苷酶如纤维素酶和α-淀粉酶都是糖苷内切酶，它们与低聚糖或聚糖内的特定的内键接有反应活性。这类糖苷内切酶在此称之为I型糖苷内切酶。虽然含有一种或多种蛋白酶和(或)糖苷酶(包括I型糖苷内切酶)的洗涤剂配方已使除污物性能大大提高，但还有许多种污物如血、粪便以及身体污物在处理后还是留下残迹。

在隐形眼镜清洗领域中，已应用类似的酶/洗涤剂配方来清洗和消毒硬式和软式隐形眼镜。在许多场合中，这些配方已用于使隐形眼镜表面形成的生物膜降解，该膜是被不同的眼病原体(如绿脓假单胞菌和表皮葡萄球菌)所利用而附着于镜片上。例如可参见Dnran，J.A.，et al.(1987)，Arch.Ophthalmol，105，106-109；Stern，G.A.，et  al.(1987)，Ophthalmolgy，94，115-119(所报道的是用不同的酶如胰酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、唾液酸苷酶来处理被粘蛋白覆盖的镜片，以抑制假单胞菌的附着)；还有Slucher，M.M，et al.(1987)，Arch.Ophthalmol，105，110-115。

利用生物膜使微生物附着并不限于隐形眼镜的情况。已报道链球菌突变体利用细胞外聚糖而附着在牙的釉质上。EPO公开号0195672报道了使用α-1，3葡聚糖酶或α-1，6葡聚糖酶来断裂被链球菌突变体利用以附着于牙釉质上的细胞外聚糖。

某些酶对于附着于玻璃表面的细胞的作用已由Danielsson，A.etal.(1977)，Botanica Marina，20，13-17所报道。其中报道了从海水中分离的假单胞菌属附着于玻璃载片上。然后，将此载片用链霉蛋白酶、胰蛋白酶、α-淀粉酶(一种I型糖苷内切酶)或溶菌酶(亦为I型糖苷内切酶)进行处理。在此文中，用蛋白水解酶即链霉蛋白酶和胰蛋白酶处理使得一部分附着细菌群落被释出，而细胞降解酶即溶菌酶与蛋白水解酶相比较显示其活性较低。据报道，α-淀粉酶完全无效。除去在隐形眼镜、牙釉体和玻璃表面会附着微生物外，还有许多种表面会附着微生物，例如请见Marrie，T.J.，et al.(1984)，J.Clin.Microbiology，19，991-914(细菌附着于心脏起搏器的导线和电源装置)；Freimer，N.B.，etal.(1978)，Acta.Path.Microbiol.Scand.Sectb.，86，53-57(微生物粘附于巨噬细胞)；Mirelman，et al.(1982)，Tokai J.Exp.Clin.Med.，7，77-183(微生物附着于哺乳动物粘膜表面)。已提出了各种不同的机制来解释微生物如细菌对非生物体固体表面的附着。例如请见Fletcher，M.(1987)，Microbiological Sciences，4，133-136；Duddridge，J.E.，etal.(1983)，Factors Affecting the Adhesion of Bacteria toSurfaces in Microbial Corrosion，Delco Printing Co.，Ltd.，PP.28-35。虽然这些参考资料描述了微生物对各种表面的附着以及在附着中可能涉及的因素，但未论及如何防止微生物在这些表面上生长以及如何将它们除掉。