[发明专利]疟疾疫苗

说明书

本发明涉及抗疟原虫属（Plasmodium）寄生物感染的疫苗，更具体地说，涉及作为抑制疟原虫感染治疗剂的多肽，该多肽包含来自一个疟原虫（Plasmodium）表面蛋白区域（该区域位于其中央重复区侧面）的致免疫表位决定簇并且含来自该重复区的重复性致免疫决定簇（含量比总数少）;本发明还涉及给人医治疟疾感染的方法。

总的来说，本发明涉及一种多肽，该多肽含有一个或多个来自位于疟原虫（Plasmodium）表面蛋白的中央重复区侧面的第一区域的致免疫决定簇，和一个或多个来自位于该重复区侧面的第二区域的致免疫决定簇，并且也含较少（少于全部总数）来自该中央重复区的重复致免疫决定簇，或者根本不含有。

在一个实施例中，本发明涉及一种多肽，该多肽含有至少一个但不是所有的疟原虫（Plasmodium）属的表面蛋白重复区的重复致免疫决定簇以及一个或多个来自位于该重复区侧面的疟原虫（Plasmodium）表面蛋白区域的致免疫决定簇。

在本发明另一个实施例中，该多肽实质上含有全部来自位于中央重复区的侧面区域的致免疫决定簇，而缺失来自该中央重复区的致免疫决定簇。另一方面，实质上含有来自侧面区域的所有致免疫决定簇的多肽进一步包含至少一个（但不是所有）来自该中央重复区的致免疫决定簇。

用于本发明的多肽的致免疫决定簇优选包括那些存在于恶性疟原虫（Plasmodium    falciparum），间日疟原虫（P.Vivax），三日疟原虫（P.malariae）和卵形疟原虫（P.Ovale）的表面蛋白中的致免疫决定簇。

而在本发明的又一实施例中，通过遗传手段将该多肽与一载体蛋白融合，优选的载体蛋白或是能加强该多肽的表达或能加强该多肽的免疫原性，或兼有两种作用。

在一个优选实施例中，本发明的多肽包含一个致免疫载体蛋白，例如：借助一个合成连接子，流感病毒非结构蛋白1的81个N-末端氨基酸（NSl81）与疟原虫（Plasmodium）环生子孢子（CS）蛋白的第一侧面区域融合，得到的融合蛋白自身与该CS蛋白的第二个侧面区域融合。

这样的多肽可进一步包括一个以上，但不是所有的来自该CS蛋白中央重复区的致免疫决定簇，例如，含有一个四肽的来自重复区的致免疫决定簇（其氨基酸序列为天氡酰胺-X-Y-脯氨酸，其中X是丙氨酸或缬氨酸，Y是天冬酰胺或天冬氨酸）。可将来自中央重复区的致免疫决定簇定位，例如，定位于载体蛋白和第一个侧面区域之间或者位于第一个侧面区域和第二个侧面区域之间。

本发明另一方面包括编码该多肽的表达载体，含该多肽的疫苗;纯化该多肽的方法;以及利用该肽对抗人体疟疾感染的治疗方法。

本发明的其他方面和优点公开于下文的详细描述中。

下面的氨基酸缩写用于本专利申请中：

Ala    丙氨酸

Arg    精氨酸

Asn    天冬酰胺

Asp    天冬氨酸

Cys    胱氨酸

Glu    谷氨酸

Gln    谷氨酰胺

Gly    甘氨酸

His    组氨酸

Ile    异亮氨酸

Leu    亮氨酸

Lys    赖氨酸

Met    蛋氨酸

Phe    苯丙氨酸

Pro    脯氨酸

Ser    丝氨酸

Thr    苏氨酸

Trp    色氨酸

Tyr    酪氨酸

Val    缬氨酸

疟原虫原生动物，疟原虫属（Plasmodium），含有许多阶段-特异性蛋白，存在于它的外侧细胞表面。已发现这些表面蛋白质有三个共同区域，即中央重复表位决定基区（或领域）以及成对的侧面区。配对区的第一个侧面区域与中央重复区的羧基端融合，配对区的第二个侧面区域与该中央重复区的氨基端融合。

本发明多肽来自于疟原虫（Plasmodium）表面蛋白的一部分，该部分含较少（少于全部总数），或不含位于第一和第二侧面区域之间的中央重复区的致免疫决定簇，且本发明的多肽被大量充分表达以用作治疗抑制疟原虫感染。