[发明专利]合成多聚免疫球蛋白受体，受体-抗体复合物，生产及应用

说明书

本发明是部分地借助于美国政府的资金作出的，因而美国政府对本发明拥有某些权利。

本发明涉及被动粘膜免疫保护的一般领域，以及多聚免疫球蛋白免疫试剂及技术的一般领域。我们用多聚免疫球蛋白抗体-即IgA和IgM-的多聚物类。IgM抗体一般产生于免疫反应的早期，并在保护性粘膜免疫学中不是一个重要因素。因此，本发明一般指的是多聚免疫球蛋白抗体，对于本发明的各个方面来说普通的和优选的抗体是IgA类抗体，这种抗体一般以二聚物形式被分泌，并且很少有聚合度较高的IgA多聚物。

许多致病的细菌和病毒最初是通过穿过胃肠道、呼吸道或生殖道的细胞内壁（上皮细胞）得以进入人体的。一种分化的抗体，IgA抗体，保护这些表面。IgA抗体是由位于上皮细胞表面之下的组织产生的二聚体或多聚体分子。它们由上皮细胞进入粘膜分泌部分，在这里它们与尚未进入人体的病原体交联或将其包覆，阻止这些病原体与上皮细胞接触或粘附在上皮细胞之上。因此，IgA抗体是作用于人体外面的病原体，它们是通过阻止病原体通过上皮细胞进入人体这种方式起保护作用的。

天然出现的IgA反应是通过将抗原输送到粘膜表面而触发的。抗原通过指定取样部位（称为微褶（microfold）或M细胞）进入人体，该部位将影响转上皮细胞抗原输送到含有粘膜免疫系统的特殊的、组织细胞聚集体的粘膜内皮区。更具体说，如图1所示，在腔1中的抗原A（表示为实点）连接位置2处的M细胞的腔表面。该抗原在3处被内在化和通过细胞（transcytosed），以便被释放在含有淋巴细胞L（B细胞和T细胞）和抗原处理/提供（antigen-processing/presenting）细胞，例如巨噬细胞（M）的上皮细胞间腔4中。

一种天然免疫的宿主中的IgA抗体通过与遍及呼吸和消化系统生殖道和乳腺的上皮细胞和含腺细胞的基础（里面的）表面上的一专门受体（叫作多聚免疫球蛋白受体）结合被输进分泌物中。见Solari和Kraehenbuhl所著“Receptor-Mediated  Transepithe-lial  Transport  of  Polymeric  Immunoglobulins”，pp.269-298  in  The  Mammary  Gland，Nelville和Daniel编辑，Plenum  Publishing，Cambridge（1987）;Mestecky（1987）J  Clin.Immunol.7：265-276。受体-IgA复合物穿过这些细胞并在胞外分泌出进入腔（表面的）细胞表面，在这里该受体通过酶的促进裂开，将IgA释放出，与被称为分泌成分（SC）的受体碎片一道进入分泌物中。见Mostov  et  al.（1980）Proc.Nat′l  Acad.Scl.U.S.A.77：7257-7261;Solari，R.and  Kraehenbuhl，J.P.Cell  36：61-71（1984）;Kuhn  and  Kraehenbuhl，J.Biol.Chem.256：12490-12495（1981）。据报导，分泌成分减少了IgA蛋白水解作用的降解。见Lindh，J.，J.Immunol.114：284-286（1975）;Brown  et  al.J.Clin.Invest.49：1374（1974）。

总的来说，涉及注入抗原的现有的免疫策略引起生成IgA类抗体，这些抗体有次序地循环并在它们进入人体后中和病原体。注入抗原一般不含引起实质性IgA反应。

致力利用在粘膜阻档层上的IgA保护作用的优点包括口服免疫，利用免疫哺乳动物的粘膜分泌，或是为了对免疫哺乳动物进行主动保护，或是为了对其他哺乳动物进行被动保护。见Glass  et  al，NEW  Eng.J.Med.，308：1389-1392（1983）;Fubara  et  al.，J.Immunol.，111（2）：395-403（1973）。单克隆IgA抗体业已生产出来，并直接应用于呼吸粘膜表面，致力于保护，防止病原体的进入。见Mazanec  et  al.，J.Virol.，61：2624-2625（1987）。