[发明专利]非A非B型肝炎病毒颗粒无效
申请号: | 91105293.3 | 申请日: | 1991-06-25 |
公开(公告)号: | CN1059758A | 公开(公告)日: | 1992-03-25 |
发明(设计)人: | 冈山博人;福家功;森千里;高风泽昭久;吉田岩 | 申请(专利权)人: | 财团法人阪大微生物病研究会 |
主分类号: | C12N7/01 | 分类号: | C12N7/01;C12N15/51;C12N15/10;C12N15/70;C12N1/21;C12Q1/70;G01N33/53;A61K39/29;A61K39/385 |
代理公司: | 中国专利代理有限公司 | 代理人: | 曹恒兴 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 肝炎 病毒 颗粒 | ||
1、含有至少一个选自非甲非乙型肝炎病毒的核心抗原、基质抗原和包膜抗原之抗原的分离的非A、非B型肝炎病毒颗粒。
2、根据权利要求1的非A非B型肝炎病毒颗粒,其中所述的核心抗原、基质抗原和包膜抗原分别由图2(1)到图2(16)中所示非A非B型肝炎病毒从第1至第9416位完整核苷酸顺序中的第333到第677位核苷酸顺序,第678到905位核苷酸顺序和第906到1499位核苷酸顺序编码。
3、根据权利要求1或2的非A非B型肝炎病毒颗粒,其具有与图2(1)到图2(16)中所示核苷酸顺序的至少一部分相应的核糖核酸。
4、生产分离之非A非B型肝炎病毒颗粒的方法,其包括:
(a)提供至多10个不同的各含有至少1000核苷酸的cDNA克隆并从至少有1000核苷酸的非A非B型肝炎病毒基因组的RNA片段制备之,所述的至多10个不同的cDNA克隆分别包括复盖在图2(1)到图2(16)所示的非A非B型肝炎病毒从第1到第9416位核苷酸完整区域中的至少从第333到第5177位核苷酸区域的克隆化cDNA片段;
(b)为了分别有预定的核苷酸顺序通过切割从所述cDNA中切取分别有预定之核苷酸顺序的cDNA片段,以便当预定的核苷酸顺序被按顺序安排时,所得的核苷酸顺序至少有一段与第333到第5177位核苷酸顺序区域相一致的区域。
(c)按顺序连接具有所说预定核苷酸序列之所说切取的cDNA片段,以构建至少含有图2(1)到图2(16)所示的非甲非乙肝炎病毒从第1到第9416位全部核苷酸顺序中的第333到第5177位核苷酸顺序的第一脱氧核苷酸。
(d)把选自所说的第一脱氧核糖核酸和按遗传密码的简异性经取代所说的第一脱氧核糖核酸中的至少一个核苷酸所得到的第二脱氧核糖核的至少一个脱氧核糖核酸导入到选自质粒和动物病毒基因的可复制的表达型载体中,当所说的可复制表达型载体是质粒时可得到含有所说质粒和导入其中之至少一个脱氧核糖核酸导入其中的可复制重组DNA,或当所说的可复制表达型载体是动物病毒基因则得到含有所说之动物病毒及所说至少一个脱氧核糖核酸导入其中的重组病毒。
(e)当用在步骤(d)中所说的可复制表达载体是质粒时,用所说的重组DNA转染原核或真核细胞,由此形成一个转化体,然后从原核或真核细胞培养的亲代细胞中筛选所说的转化体。
(f)培养步骤(2)中从原核或真核细胞获得的转化体,以产生一个非甲非乙肝炎病毒颗粒或者培养步骤(d)中从真核细胞得到的重组病毒以与动物病毒一起产生非A非B型肝炎病毒颗粒,并且
(g)分离所说的非A非B型肝炎病毒颗粒。
5、根据权利要求4的方法,其中所说的第一脱氧核糖核酸含有第333到第5918位核苷酸的核苷酸顺序。
6、根据权利要求4的方法,其中所说的第一脱氧核糖核酸含有第333到第6371位核苷酸的核苷酸顺序。
7、根据权利要求4的方法,其中所说的第一脱氧核糖核酸含有第333到第9362位核苷酸的核苷酸顺序。
8、根据权利要求4的方法,其中所说的第一脱氧核糖核酸含有第1到第9416位核苷酸的核苷酸顺序。
9、重组体,其含有一个选自质粒和动物病毒基因的可复制的表达型载体和一个脱氧核糖核酸,脱氧核糖核酸选自至少含有图2(1)到图2(16)所示非A非B肝炎病毒第1到第9416位核苷酸完整核苷酸顺序中第333到第5177位核苷酸的第一脱氧核糖核酸顺序和按遗传密码的简异性取代所说的第一核苷酸顺序中至少一个核苷酸所得到的第二核苷酸顺序。
10、根据权利要求9的重组体,其中所述的第一核苷酸顺序含有第333玻第5918位核苷酸的核苷酸顺序。
11、根据权利要求9的重组体,其中所述的第一核苷酸顺序含有第333到第6371位核苷酸的核苷酸顺序。
12、根据权利要求9的重组体,其中所述的第一核苷酸顺序含有第333到第9362位核苷酸的核苷酸顺序。
13、根据权利要求9的重组体,其中所述的第一核苷酸顺序含有第333到第9416位核苷酸的核苷酸顺序。
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