[发明专利]治疗Kaposi肉瘤所用组合物的制备方法

说明书

本发明涉及用共同人类白细胞干扰素治疗细胞增殖紊乱的方法。本发明还涉及共同人类白细胞干扰素的药用组合物，此共同人类白细胞干扰素适于治疗细胞增殖紊乱。

干扰素是细胞活素的一个亚类，此细胞活素呈现抗病毒及抗增殖两种活力。在生物化学及免疫学性质的基础上，将人类干扰素分为三类：干扰素α(白细胞)、干扰素β(纤维细胞)及干扰素γ(免疫)具有不同氨基酸顺序的14种α干扰素(分组为亚类型A到H)已通过将DNA分离和编序来鉴别，该DNA给这些多肽编码。作为潜在的治疗药剂，α干扰素已受到相当注意，这是由于它们的抗病毒及抗肿瘤生长抑制作用。

在美国专利4,503,035中描述了由从全血的血沉棕黄层部分分离的人类白细胞，提纯干扰素。以这种方式制备的人类白细胞干扰素包含一些不同的人类白细胞干扰素氨基酸顺序的一种混合物。被提纯的物质，当在MDBK牛细胞系上测定时，具有从0.9×10⁸至4×10⁸单位/毫克的蛋白质的比活性，当在Ag1732人类细胞系上测定时，具有从2×10⁶至7.6×10⁸单位/毫克的蛋白质比活性。美国专利4,241,174公开了用来确定干扰素抗病毒活力的细胞病效应抑制测定法。所测的干扰素活力对照一用于人类白细胞干扰素的参考标准来校正，此人类白细胞干扰素由国家卫生研究所提供。

美国专利4,530,901公开了重组DNA质粒的构造，该重组DNA质粒包含给至少部分人类白细胞干扰素编码的一些顺序及一种多肽在E.coli中的表达，而所述多钛具有人类白细胞干扰素的免疫及生物活力。

美国专利4,414,150、4,456,748及4,678,751公开了杂种α-干扰素基因的构造，该杂种α-干扰素包含一些不同亚类型顺序的组合(例如，A和D，A和B，及A和F)。

美国专利4,695,623及4,897,471公开了新的、具有一些氨基酸顺序的人类白细胞干扰素多肽，这些氨基酸顺序包括一些普通或主要的氨基酸，这些氨基酸可在自然出现的α干扰素的亚类型的一些多肽中间的每个位置找到，所述那些氨基酸顺序被叫作共同人类白细胞干扰素(IFN-con)。这些所公开的IFN-con氨基酸顺序被命名为IFN-con₁、IFN-con₂及IFN-con₃。所制作的给IFN-con编码的那些基因的制备，以及所述那些基因在E.coli中的表达也被公开了。

Klein等人(J.Chromalog 454，205-215(1988)说明了提纯E.coli中产生的IFN-con₁。据报道，以这种方式提纯的IFN-con₁具有3×10⁹单位/毫克的蛋白质比活性，这是在细胞病效应抑制测定中用T98G人类细胞系测定的(Fish等人，J.Interen Res.9，97-114(1989))。所提纯的IFN-con₁包括三种异构形式(isoform)，这是由等电聚焦确定的，这三种异构形式被鉴定为甲硫氨酰基IFN-con₁、去甲硫氨酰基IFN-con₁及带有用乙酰基封闭它的N-末端的去甲硫氨酰基IFN-con₁(Klein等人，Arch.Biochem.Biophys.276，531-537(1990))。

在美国和其它一些国家，现在已批准将α-干扰素用于治疗毛发细胞白血病、性病疣、Kaposi氏肉瘤(通常折磨患获得性免疫缺乏综合症(AIDS)的一些病人的一种癌)、及慢性非A型非B型肝炎。α干扰素的两个变种在用于治疗方面已得到批准；干扰素α-2a以商业名称ROFERON-A投放市场，而干扰素α-2b以商业名称INTRON-A投放市场。在一单个位置，ROFERON-A及INTRON-A的那些氨基酸顺序不同，但在其它方面与α-干扰素亚类型2(亚类型A)的上述氨基酸顺序等同。