[发明专利]诊断剂的制备

说明书

本发明涉及诊断剂的制备，该诊断剂包括用于增强超声成像的空心蛋白质微胶囊。

知道人体内的气泡可以用于回波心动描记法这一事实已有一段时间了。为了这一目的，可将含有气泡的液体注入血流中〔见Ophir等人的（1980）“超声成像”2，66-77，他们将气泡稳定在胶原蛋白膜上，美国专利US-A-4，446，442（Schering）和欧洲专利EP-A-131，540（Schering）〕以及欧洲专利EP-A-224，943和EP-A-324，938公开了通过声波处理一种白蛋白溶液制备的气泡的应用。然而，气泡大小的分布显然是不可控制的，而且当气泡经受到由左心室产生的压力时会消失（Shapiro等人（1990）J.Am.Coll.Cardiology，16（7），1603-1607）。

EP-A-52575为同一目的公开了携带气体的固体颗粒，气体在血流中从颗粒中释放出来。

EP-A-458，745（Sintetica）公开了一种通过合成聚合物，如聚交酯和聚乙交酯的界面聚合反应制备充满空气或气体的微气泡的方法。WO  91/12823（Delta）公开了一种利用白蛋白的类似方法。Wheatley等人（1990）在Bioma-terials，11，713-717公开了藻酸盐的离子凝胶作用以形成直径大于30微米的微气泡。WO  91/09629公开了用作超声对比剂的脂质体。

我们现在已经发现了一种将微胶囊形成剂溶液雾化，然后降低所形成胶囊的可溶性的方法可产生一种改进的产品，Przyborowski等人（1982，Eur.J.NuCl.Med.  7，71-72）公开了通过喷雾干燥来进行放射标记的方法制备人类血清白蛋白（HSA）微球体以及随后在肺部闪烁扫描成像中的应用。微球体未被说成是空心的，且在反复制作中，我们只作出了固态微球体。除非颗粒是空心的，否则这些颗粒不适于回波心动图。此外，该微球体是采用一步法制备的，该方法不适于制备用于回波心动图的微胶囊，在已有方法中，必须从微球体中除去未变性的白蛋白（在我们的方法中不必这样做）;并且显然所获得的微球体的尺寸范围宽，因为必须要进行进一步的筛选。因此，Przyborowski等人的方法不仅不是一个明显的可选择用于制备用于超声成像的微胶囊的方法，而且制成的颗粒不适于该目的。我们已发明了一种大大优于该已有方法的改进方法。

Przyborowski等人的文章提到了两种早些时候已公开的获得用于肺部闪烁扫描的白蛋白颗粒的方法。Aldrich和Johnston（1974）Int.J.Appl.Rad.Isot.25，15-18公开了利用一个旋转圆盘产生3-70微米直径的颗粒，然后将颗粒在热油中变性，除去油份并将颗粒用放射性同位素标记。Raju等人（1978）在Isotopenpraxis  14（2），57-61中利用同样的旋转圆盘技术，但采用简单加热颗粒使白蛋白变性。没有一种情况提到空心微胶囊，并且制成的颗粒都不适用于回波心动图。

本发明的一个方面是提供一种方法，包括第一步，为了获得微胶囊，将一种构成壁物质的溶液或分散体雾化。

优选地，由此获得的制品经过第二步，降低至少所述微胶囊外侧的水溶性。

所说的两个步骤可以作为一个单一的方法进行，或者收集第一步的中间产品，并在第二步骤中单独进行处理。这两种可能性在此后被称作一步法和二步法。

形成壁的物质和工艺条件应该这样选择以使得制品在使用条件下为充分地无毒的和非致免疫的，使用条件很清楚依赖于施用剂量和治疗时间。形成壁的物质可以是一种淀粉衍生物，一种合成聚合物，如聚谷氨酸叔丁基羰氧基甲基酯（美国专利第4，888，398号）或一种聚糖如聚葡萄糖。