[发明专利]A-C-B胰岛素原，其生产方法和应用，以及胰岛素生产中的中间体

权利要求书

1、一种药物制剂的制备方法，该制剂含有作活性成分的化学式如下的多肽化合物：

其中：

Met=氨基酸蛋氨酸，

X=0或1，

A=胰岛素的A链或其功能性衍生物，

B=胰岛素的B链或其功能性衍生物，

C=胰岛素的C肽或一种化学式如下的肽：

其中：

X ₁ 、X ₂ 、X ₃ 和X ₄ 是碱性氨基酸，

X ₁ 、X ₂ 、X ₃ 和X ₄ 是相同或不同的，和

P=不含半胱氨酸残基的4-35个氨基酸的肽，

该方法将所说多肽化合物与一种或多种药物可接受的载体、赋形剂或其稀释剂相混合。

2、一种化学式如下的多肽化合物的重组体制备方法：

其中：

Met＝氨基酸蛋氨酸，

X＝0或1，

A＝胰岛素的A链或其功能性衍生物，

B＝胰岛素的B链或其功能性衍生物，

C＝胰岛素的C肽或化学式如下的肽：

其中：

X₁、X₂、X₃和X₄是碱性氨基酸，

X₁、X₂、X₃和X₄是相同或不同的，及

P＝不含半胱氨酸残基的4-35个氨基酸的肽。

所说方法包括如下步骤：

a、构建一种编码所说的一种多肽化合物的DNA顺序，

b、将所说DNA顺序加入一种合适的含有在宿主细胞中功能性的启动子-操纵基因区的载体中，

c、将所说DNA顺序定位在该载体中，以达到该DNA顺序的转录和转译，而且还使该DNA顺序在所说启动子-操纵基因区的转录控制下，

d、用该载体转化所说的宿主细胞，

e、在适合诱发该基因转录和转译的条件下培养所说的已转化的宿主细胞，和

f、回收和纯化通过所说DNA顺序编码的多肽产物。

3、一种化学式如下的多肽化合物的制备方法：

其中：

Met＝氨基酸蛋氨酸，

X＝0或1，

A＝胰岛素的A链或其功能性衍生物，

B＝胰岛素的B链或其功能性衍生物，

C＝胰岛素的C肽或化学式如下的肽：

其中：

X₁、X₂、X₃和X₄是碱性氨基酸，

X₁、X₂、X₃和X₄是相同或不同的，和

P＝不含半胱氨酸残基的4-35个氨基酸的肽，

该方法用固体一相肽合成。

4、一种制备胰岛素的方法，该方法包括如下步骤：

a、制备一种化学式如下的多肽化合物：

其中：

Met＝氨基酸蛋氨酸，

X＝0或1，

A＝胰岛素的A链或其功能性衍生物，

B＝胰岛素的B链或其功能性衍生物，

C＝胰岛素的C肽或化学式如下的肽：

其中：

X₁、X₂、X₃和X₄是碱性氨基酸，

X₁、X₂、X₃和X₄是相同或不同的，和

P＝不含半胱氨酸残基的4-35个氨基酸的肽，

b、用合适的肽酶或化学试剂分裂所说多肽以切下C-肽。

5、一种制备胰岛素的方法，该方法包括如下步骤：

a、构建一种编码化学式如下的多肽化合物的DNA顺序：

其中：

Met＝氨基酸蛋氨酸，

X＝0或1，

A＝胰岛素的A链，或其功能性衍生物，

B＝胰岛素的B链或其功能性衍生物，

C＝胰岛素的C肽或化学式如下的肽：

其中：

X₁、X₂、X₃和X₄是碱性氨基酸，

X₁、X₂、X₃和X₄是相同或不同的，和

P＝不含半胱氨酸残基的4-35个氨基酸的肽，

b、将所说DNA顺序加入一种合适的、含有在宿主细胞中功能性的启动子-操纵基因区的载体中，

c、将所述DNA顺序定位在所说载体中，以达到该DNA顺序的转录和转译，而且使该DNA顺序在所说启动子-操纵基因区的转录控制下，

d、用所说载体转化该宿主细胞，

e、在适合诱发所说基因转录和转译的条件下，培养所说转化的宿主细胞，和

f、回收和纯化用该DNA顺序编码的多肽产物，

g、用合适的肽酶或化学试制分裂通过所说基因编码的该多肽产物以切下C-肽。