[发明专利]用于同时检测HIV-1、HIV-2、HTLV-Ⅰ和HTLV-Ⅱ抗体的免疫检测法

说明书

本发明涉及可用于同时检测生物学样品中抗以下病毒的抗体的免疫检测药盒：HIV-1、HIV-2、HTLV-Ⅰ和HTLV-Ⅱ。本发明也涉及制造这类免疫检测药盒的方法。

Ⅰ亚型人T-细胞白血病病毒（HTLV-Ⅰ）是与成人T-细胞白血病/淋巴瘤（ATL）密切相关的一种逆病毒（Poiesz    et    al，1980，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.77，7415-7419），它也与被称作为热带痉挛性下肢轻瘫和HTLV-Ⅰ相关性骨髓病（HAM）的神经疾病相关联（Gessain    et    al.，1985，Lancet    ii，407-410）.Ⅱ亚型人T-细胞白血病病毒（HTLV-Ⅱ）首先是从患有T-细胞毛细胞白血病的患者体内分离（Kalyanaraman    et    al.，1982，Science218，571-573）。该病毒与毛细胞白血病的T-细胞变种有关。

成人T-细胞白血病/淋巴瘤（ATL）主要发生于日本西南部、加勒比海流域以及中美和南美的部分地区。在这些地区，整个人群的血清阳性者为5%-15%，而在较大年龄组则达到30%。在美国，HTLV-Ⅰ/Ⅱ感染主要是在静脉使用毒品者中。在最近的一份美国红十字会报告中（Williams    et    al.，1988，Science，240，643-646），八个美国城市的39，898名随机献血者中就有10个能检测到抗HTLV-Ⅰ抗体;它所对应的血清流行率为0.025%。在对埃及北方3158人所进行的类似研究中鉴定出两名携带者（流行率为0.06%）（El-Farrash    et    al，1988，Microbiol.Immunol.，32，981-984）.在这两项研究中并未清楚地区分HTLV-Ⅰ和HTLV-Ⅱ感染。

获得性免疫缺陷综合症（艾滋病）、与艾滋病相关的综合症（ARC）以及前艾滋病也被认为是由逆病毒，具体是人免疫缺陷病毒（HIV）引起的。最早的艾滋病相关病毒HIV-1（也被称为HTLV-Ⅲ、LAV-1和ARV）已被充分鉴定。另一类称为HIV-2（原来称为LAV-2）的病原性人逆病毒现已从患有艾滋病的西非患者身上分离出来（如见WO87/04459）。最近已证实HIV-2与HIV-1和猿免疫缺陷病毒（SIV）共有大量的保守序列。

HTLV-Ⅰ和HTLV-Ⅱ在形态及遗传结构上均不同于人免疫缺陷病毒HIV-1和HIV-2。其结果是，抗HIV抗原的抗体不应与HTLV-Ⅰ和HTLV-Ⅱ抗原有交叉反应。但是，取自艾滋病患者的血清样品都显示出与HTLV抗原有一定程度的交叉反应性（Essex    et    al.，1983，Science，220，859-862）.。

现有技术中已有几个用于单独检测抗HTLV抗原或抗HIV抗原之抗体的诊断检测法的实例。例如，Saxinger等（1984，Science，225，1473-1476）就曾提到在酶免疫检测法（EIA）中利用HTLV-Ⅰ抗原作为免疫吸附剂以检测HTLV-Ⅰ抗体。另一个例子为Gnann等人（1987，J.Virol，61，2639-41）提到的可用于检测HIV-1抗体的肽序列。

最近，已有人试图提供可同时检测抗HTLV和HIV抗原之抗体的诊断药盒。例如，加拿大专利1，245，982和欧洲专利申请136，798提到了用于同时检测HTLV-Ⅰ、HTLV-Ⅱ和HTLV-Ⅲ（HIV-1）抗体的检测药盒。在这些药盒中，HTLV抗原衍生于得自各种转化细胞系的HTLV病毒颗粒。另外，PCT专利申请WO90/08162涉及利用得自HTLV-Ⅰ的包膜蛋白和合成的HIV肽的抗原同时检测HTLV-Ⅰ、HIV-1和HIV-2抗体的检测药盒。

但是，所有以上检测法均没有提供一种同时检测HTLV-Ⅰ、HTLV-Ⅱ、HIV-1和HIV-2抗体的灵敏方法。事实上，即使对HIV-1、HIV-2、HTLV-Ⅰ和HTLV-Ⅱ抗体的独立检测法分别加以考虑，所有以上检测法也都不能提供一种完全可以接受的诊断试验。