[发明专利]“蛇毒凝血酶”及“去纤酶”的联产工艺

权利要求书

1、止血灵(蛇毒凝血酶)及去纤酶的联产工艺，它包括：(1)蛇毒用缓冲液溶解，离心沉淀并经阴离子交换剂柱层析，用缓冲液洗脱可同时得到去纤酶及止血灵粗组分；(2)将所得去纤酶及止血灵粗组分又分别经阴离子交换剂柱层析两次以上纯化得精制的去纤酶及止血灵溶液；(3)将精制去纤酶及止血灵溶液再经脱盐得去纤酶及止血灵(凝血酶)原液；(4)将所得去纤酶及止血灵原液再分别配方、过滤、分装、冷冻干燥、熔封即得注射用去纤酶及止血灵成品，其特征在于：

a.蛇毒用PH7.2-8.8的缓冲液溶解，经阴离子交换剂柱层析，用PH7.2-8.8缓冲液氯化钠直线梯度洗脱可同时得到粗分的去纤酶及止血灵粗分组分；

b.将所得去纤酶和止血灵粗组分分别再经阴离子交换剂两次以上柱层析，用PH7.2-8.8缓冲液氯化钠直线梯度两次以上洗脱纯化得精制去纤酶及止血灵溶液；

c.粗分所得去纤酶及止血灵组分以及再纯化中所得去纤酶及止血灵溶液可直接上样，全工序操作在10-20℃半无菌或无菌室中进行。

2、根据权利要求1所述的联产工艺，其特征在于溶解蛇毒所用的缓冲液是0.05-0.10M，Tris-HCl缓冲液或甘氨酸-NaCl缓冲液。

3、根据权利要求1所说的联产工艺，其特征在于粗分所用阴离子交换剂是DEAE-Sephadex  A-50或QAE-Sephadex  A-25。

4、根据权利要求1所述的联产工艺，其特征在于粗分所用氯化钠梯度为0-1.2M。

5、根据权利要求1所述的联产工艺，其特征在于两次以上柱层析纯化所用阴离子交换剂是DEAE-Cellulose  DE52或DE32和DEAE-SEphadex  A-50或QAE-Sephadex  A-25。

6、根据权利要求1所述的联产工艺，其特征在于两次以上柱层析纯化洗脱所用缓冲液氯化钠梯度：去纤酶为0.1-0.8M;止血灵为0.3-0.9M。