[发明专利]从人体胎盘中提取核酸的方法无效
申请号: | 93111041.6 | 申请日: | 1993-04-09 |
公开(公告)号: | CN1032755C | 公开(公告)日: | 1996-09-11 |
发明(设计)人: | 崔秀云 | 申请(专利权)人: | 大连医学院 |
主分类号: | C07H21/04 | 分类号: | C07H21/04;C07H1/08;A61K31/70 |
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地址: | 辽宁省*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 人体 胎盘 提取 核酸 方法 | ||
1.一种从人体胎盘中提取核酸的方法,其特征在于:a、原料及其处理:取人的新鲜胎盘在-10℃~70℃迅速冷冻,并在-4℃~-10℃去除脐带、胎膜及结缔组织,b、破碎胎盘组织:在-4℃~-10℃加入有如下摩尔体积比的提取液A即Tris-HCl∶EDTA∶NaCl=5∶1∶1(mol/L),其加入量是胎盘体积的5~10倍,然后置于高速匀浆器中匀浆,过滤,向滤液中加入10%的且为滤液体积1/100的SDS,并用10%~20%的NaOH将混合物的PH值调至8~10,在室温下搅拌1~2小时,c、提取核酸:向上述裂解液中加入等体积的新蒸酚与提取液A的体积比为70~75∶30~25的饱和酚,混合均匀后在2~4℃下离心20~40分钟,取上清液再向其内加入等体积饱和酚多次反复操作,d、提取核酸的处理:将提取的上清液置于备有电磁搅拌的玻璃纸透析袋内,于4℃下用流动蒸馏水作为透析外液,经过3~4天后更换成有如下摩尔体积比的Tris-HCl∶EDTA∶NaCl=1∶1∶1的静止透析外液E,透析2~3天即可得到脱氧核糖核酸。
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