[发明专利]感觉神经抗体及其制备方法无效
申请号: | 93111758.5 | 申请日: | 1993-09-22 |
公开(公告)号: | CN1057128C | 公开(公告)日: | 2000-10-04 |
发明(设计)人: | 顾晓松;张沛云;陈昌富;严志强;曹铮 | 申请(专利权)人: | 南通医学院 |
主分类号: | C12P21/08 | 分类号: | C12P21/08;C12N15/02;C12N5/12;A61K39/395 |
代理公司: | 江苏省南通市专利事务所 | 代理人: | 葛雷 |
地址: | 226001*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 感觉神经 抗体 及其 制备 方法 | ||
1、一种感觉神经抗体,其特征在于:该抗体是由杂交瘤细胞株CCTCCNO:C93004分泌的。
2、一种制备感觉神经抗体的方法,其特征在于:包括如下步骤:
(a)取作为抗原的哺乳类感觉神经特异蛋白;
(b)用抗原免疫小鼠,然后提取小鼠细胞;
(c)将经免疫的小鼠的细胞与骨髓瘤细胞融合,并接种、培养克隆;
(d)用细胞免疫化学法检测抗体,筛选阳性克隆,筛选出只对感觉神经元起免疫反应的阳性克隆,再经有限稀释法克隆化三次以上,获得分泌感觉神经抗体的杂交瘤细胞株CCTCCNO:C93004。
3、根据权利要求2所述的制备感觉神经抗体的方法,其特征在于,取哺乳类感觉神经特异蛋白的步骤是:取哺乳类神经组织,匀浆、离心、提取上清液,再以等电点聚焦SDS凝胶电泳区分出感觉神经特有的蛋白区带,将蛋白回收、纯化。
4、根据权利要求3所述的制备感觉神经抗体的方法,其特征在于:等电点聚焦SDS凝胶电泳的PH控制在3-11。
5、根据权利要求2或3或4所述的制备感觉神经抗体的方法,其特征在于:用抗原免疫小鼠的步骤是:向小鼠腹腔内注入与完全福氏佐剂等量混合的感觉神经蛋白100微克,2-4周后,再向小鼠腹腔注入与不完全福氏佐剂等量混合的感觉神经蛋白100微克,再过1-3周后,向小鼠腹腔内再注入感觉神经蛋白100微克,过2-4天后提取小鼠的脾细胞。
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