[发明专利]用作超声波回波检测术增强剂的稳定微泡悬浮液

说明书

本发明涉及在水液载体中的充气微泡可注射悬浮液，悬浮液含两亲化合物，其中至少有一种是用于防止由于时间和压力而导致的微泡破灭的磷脂稳定剂。该磷脂稳定剂可以是薄片状或层状的。本发明还涉及在超声波检测术中可用作对比剂的稳定微泡悬浮液的制备方法。

气体微泡在载体液中的悬浮液用作有效的超声反射体，这在现有技术中是众所周知的。早先观察到快速静脉注射可使溶解的气体从溶液中逸出成为气泡，随之发展了将微泡悬浮液作为回声药剂以增强超声波成像。由于声阻抗相对血液存在的实质差异，发现这些血管内气泡是极好的超声波反射体。将气体微泡在载体液中的悬浮液注射到活组织的血流内，显著地增强了超声波回波检测成像的能力，从而增强内部器官的显现。器官和深部组织成像在确定医学诊断上可能是决定性的，因此在发展高浓度气体微泡稳定悬浮液上投入了很大的努力，这种悬浮液同时又是易于制备和使用，含有最小限度非活性物质，能够长期贮存并易于分发。虽然针对能满足这些标准的溶液已作了大量努力，但迄今尚没有一种能提供完全满意的结果。

从EP-A-0077752(Schering)得知，通过将表面活性剂的水溶液和作为稳定剂的增粘剂溶液混合，可制得气体微泡悬浮液。使试剂混合物和空气通过一小孔，将气泡引入混合物。向得自含表面活性剂和碳酸氢钠的溶液和增粘剂溶液的混合物中加一种酸，可以得到CO₂微泡悬浮液。但是，在临用前才将各成分混合，制备后立即将溶液用完/注射完。所公开的表面活性剂包括卵磷脂；脂肪酸和带聚氧乙烯的脂肪醇和聚氧乙烯化多元醇如山梨糖醇、乙二醇类和甘油、胆甾醇的酯类和醚类；及聚氧乙烯-聚氧丙烯聚合物类。所公开的表面活性剂在悬浮液中的浓度为0.01％-10％(重量)之间，要求保护的较佳范围为0.5％-5％之间。增粘剂和稳定剂化合物包括诸如单糖和多糖类(葡萄糖、乳糖、蔗糖、葡聚糖、山梨糖醇)；多元醇类，如甘油、聚乙二醇类；及多肽类，如蛋白质、明胶、氧化聚合明胶、血浆蛋白等。增粘剂的总量限定在0.5-50％。该专利文献也揭示了将聚氧丙烯-聚氧乙烯聚合物(如Pluronic^F-68)用作增粘剂。在优选的实施例中，将等量表面活性剂、0.5％(重量)Pluronic^F-68(一种聚氧丙烯-聚氧乙烯共聚物)的水溶液和增粘剂(10％乳糖溶液)在无菌条件下剧烈振摇以得到微泡悬浮液。所得的悬浮液维持2分钟，含近50％直径低于50μm的气泡。根据该文献，可以应用高达50％的表面活性剂和/或增粘剂，但具体实施例是使用1％-4％的Pluronic^F-68。

WO-91/15244(Schneider et.al)揭示了可用作超声波回声检测术成像剂的容易制备的水悬浮液。该悬浮液含薄片状和/或层状成膜表面活性剂，并可任意选择地含亲水性稳定剂。层状化的表面活性剂可以是脂质体的形式，即一般是球形的微细囊泡。这些囊泡通常由一种或几种紧密排列的两亲化合物(即兼有亲水性和疏水性基团的化合物)的双分子层组成。双层分子是这样编排的：疏水性基团头对头，亲水性基团指向水相。在和水相混合前或混合后，将层状化的表面活性剂与空气或一种气体接触，制得悬浮液。成膜表面活性剂向薄片状转化是按各种脂质体的形成技术来进行的，这些技术包括高压匀化或在声波或超声频率下进行声波处理。该文件所要求保护的磷脂的浓度为0.01％-20％之间，微泡浓度为10⁸-10⁹个气泡/ml。微泡悬浮液维持稳定可达数月。实施例1中磷脂浓度为0.5％。

WO-92/11873(Beller et.al.)公开了针对稳定回声源悬浮液的尝试。该文用聚氧乙烯/聚氧丙烯聚合物和带负电的磷脂如磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸以及其可溶型(lysoform)，制备设计用来吸收和稳定微泡的用来作为回声检测对比剂的水质制剂。在制剂中磷脂的浓度范围可在0.01％-5％(体积或重量)之间，然而具体公开并要求保护的是含1％的二棕榈酰磷脂酰甘油(DPPG)的制剂。除了带负电的磷脂外，组合物还必须含有0.1％-10％的聚合物质(Pluronic^F-68)。制剂中溶质的总量为5.1％-10.4％之间。微泡的浓度未予报导，但根据所得的结果，可估计为约10⁷个气泡/ml。据报告，悬浮液的稳定性比EP-A-0077 752中的好。