[发明专利]促听神经生长的外用点滴水剂及其制备方法无效
申请号: | 94108402.7 | 申请日: | 1994-07-12 |
公开(公告)号: | CN1144095A | 公开(公告)日: | 1997-03-05 |
发明(设计)人: | 徐飞 | 申请(专利权)人: | 徐飞 |
主分类号: | A61K35/30 | 分类号: | A61K35/30;C12P1/00;C12P21/00;C12N9/50 |
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地址: | 518003 广东省深圳市罗湖*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 听神经 生长 外用 点滴 水剂 及其 制备 方法 | ||
1、一种促听神经生长的外用点滴水剂,其特征在于包括取自3-6个月健康哺乳动物的听神经,经生物酶化处理后所得的促听神经生长因子及抗生素。
2、根据权利要求1所述的促听神经生长外用点滴水剂的制备方法,其特征在于:
(1)取健康哺乳动物的听神经,称其重量,按重量比1∶3的比例加入三蒸水或0.95%生理盐水,中性蛋白酶或胃蛋白酶、超氧化物歧化酶,进行消化沉淀;
(2)在(1)所得的沉淀物中按每50mg加入20滴左右0.5%的正辛醇,将所得混合物在12000转/分的转速下匀浆3-5分钟,反复3-5次;
(3)在-20℃左右的温度下将(2)的匀浆物反复冻融6次以上,或超声打碎,使细胞裂解;
(4)将(3)的所得物在4℃左右的温度下,以4000转/分的转速条件下离心分离25-35分钟,弃沉淀物,取上清物;
(5)将(4)所得之上清物中加入5/1000的DNA酶及0.4U胰蛋白酶或中性蛋白酶铬蛋白酶47U,在25℃、PH值为7.6含钙环境下进行裂解;
(6)将(5)所得的裂解物在4℃的环境条件下,以8000转/分的转速离心分离30分钟左右,取上清物;
(7)将(6)所得之上清物经2万分子量的超滤膜超滤,超滤所得的上清液置90℃环境条件下变性15~20分钟;
(8)将(7)所得变性物中加入抗生素,分装瓶中
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