[发明专利]促听神经生长的外用点滴水剂及其制备方法

说明书

本发明涉及一种利用生物酶制备的用于治疗听神经萎缩造成的失聪及其它耳部疾患的促听神经生长的外用点滴水剂及其制备方法。

神经生长因子(NGF)是60年代末首先从小鼠颌下腺分离纯化获得的一种蛋白质。以后人们又从蛇毒人胎盘、牛精囊和豚鼠前列腺等赃器中发现也含有丰富的NGF，并相继得到纯化。1986年NGF的发现曾获得诺贝尔生理学和医学奖。80年代后，科学家们又发现在脑中神经突触体上有与NGF结合的位点，当刺激神经元膜上的NGF受体时，可介导神经元的营养功能，由此证明NGF对中枢神经元的生长、存活，纤维的增生及递质特异性表现有独特的作用。1982年Tatemoto等人首先从猪脑中发现并提取分离出神经肽(Neuropeptie NGP)，它对脑血管的收缩与舒张有影响。

据有关文献记载，哺乳类动物的脑及脑干是一个高度专门化的器官集合体。进化到人已是更为完善的器官，由于脑及脑干脊髓不同部位含有不同的神经肽(目前已知的有20余种)，它们对支配机体运动、感觉、内分泌等均有不同功能的相应神经肽NGP，且NGP是NGF中最重要的一种营养性多肽，具有广泛的生理作用，能刺激新生动物感官及交感神经节的发育，在组织培养中也能刺激交感神经节的生长。如促神经生长肽中的CCK-33肽及CCK-8肽(CCK指胆囊收缩素)广泛分布于动物的脑区，尤以大脑皮质中为多。CCK-8肽含量最高，在丘脑、脑干及脊髓中含量次之(为大脑皮质的1/20)，能使食欲迅速减退，抗肥胖效果好；P-物质在下丘脑、视前区和脑干中浓度较高，在小脑、大脑皮层等中也有分布，具有催涎作用可刺激垂体分泌催乳激素和生长激素；脑啡肽弥散于整个脑区、脊髓及外周神经节，β-内啡肽比较集中在丘脑-垂体平面以及延伸至间脑与桥脑前侧。但至今对于这些促神经生长肽(包括促视神经生长肽)的提纯分离，并将之制成专门用于治疗由听神经萎缩造成的失聪及耳部疾患的尚未见诸报道。

本发明的目的在于提供一种能够促进听神经生长，能有效治疗由于听神经萎缩造成的失聪及其它耳部疾患的外用点滴水剂及其生产方法。

本发明的技术解决方案如下：

依照本发明制得的促听神经生长的外用点滴水剂，特征在于包括取自3-6个月健康哺乳动物的听神经，经过生物酶化处理后制得的促听神经生长肽以及抗生素。

依照本发明制备的促听神经生长的点滴水剂的制备方法，其特征是：取健康哺乳动物【如猪、人胎(经PCR方法检测无肝炎、梅毒、淋病、)】的听神经，称其重量，按重量比1∶3的比例加入三蒸水或0.95％的生理盐水，然后加入中性蛋白酶或胃蛋白酶、超氧化物歧化酶，进行消化沉淀，按所得沉淀物量每50mg左右加入20滴左右0.5％的正辛醇；将所得混合物置于匀浆机内，在12000转/分的转速下匀浆3-5分钟，反复3-5次；置匀装物于-20℃左右的环境中反复冻融6次以上，或超声打碎，使细胞裂解；然后在4℃左右的温度下，在4000转/分的转速下离心分离25-35分钟，弃沉淀物，取上清物；再在所取的上清物中加入5/1000的DNA酶及0.4U胰蛋白酶或中性蛋白铬蛋白酶47U于25℃的环境条件下，在PH值为7.6含钙的环境中裂解；将裂解物置于4℃的环境中，用8000转/分的转速进行离心分离30分钟左右；取上清液弃沉淀，用分子量2万的超滤膜进行超滤，将超滤所得上清置于90℃环境中变性15-20分钟，使其具有耐热稳定性再加入抗生素。

本发明的优点在于依照本发明的制备方法制得的促听神经生长的外用点滴水剂，对治疗人体的由于听神经萎缩造成的失聪及其它耳部疾患效果良好。