[发明专利]二聚体块的合成及其在装配寡核苷酸中的应用

权利要求书

1、一种合成具有烷基膦酸酯、氨基磷酸酯、硫代磷酸酯或烷基硫代膦酸酯核苷酸间连键的二聚体块的方法，该方法包括以下步骤：

(a)将第一个具有5′端保护基和3′端缩合基的核苷衍生物，与第二个具有3′端保护基和5′端羟基的核苷衍生物缩合，形成具有还原的核苷酸间连键的二核苷酸衍生物，

(b)用一适当的氧化剂氧化该核苷酸间连键，生成二聚体块烷基膦酸酯、氨基磷酸酯、硫代磷酸酯或烷基硫代膦酸酯。

2、根据权利要求1的方法，其中，该核苷酸间连键是氨基磷酸酯连接，该第一个核苷衍生物是一个具有H-膦酸酯缩合基，5′端保护的核苷，并且该氧化剂为烷基胺或芳基胺。

3、根据权利要求1的方法，其中，该核苷间连键是烷基膦酸酯连键，该第一个核苷衍生物是5′保护的核苷-3′-烷基N，N-二异丙基氨基磷酸酯，并且该氧化剂为碘。

4、根据权利要求1的方法，其中，该核苷酸间连键为烷基硫代膦酸酯连键，该第一个核苷衍生物是一个5′保护的核苷-3′-烷基N，N-二异丙基氨基磷酸酯，并且该氧化剂为硫化试剂。

5、根据权利要求1的方法，其中，该核苷酸间连键为硫代磷酸酯连键，该第一个核苷衍生物是一个5′保护的核苷-3′-O-烷基N，N-二异丙基氨基磷酸酯或核苷3′-H-膦酸酯，并且该氧化剂为硫化试剂。

6、如图5所示的二聚体块，其中，P为保护基，L为烷基膦酸酯、氨基磷酸酯、硫代磷酸酯、或烷基硫代膦酸酯基，G为保护基、羟基、或亚磷酰胺或H-膦酸酯基，B1为G、A、T或C，B2为G、A、T或C。

7、根据权利要求6的二聚体块，其中，L为烷基膦酸酯基。

8、根据权利要求6的二聚体块，其中，L为氨基磷酸酯基。

9、根据权利要求6的二聚体块，其中，L为硫代磷酸酯基。

10、根据权利要求6的二聚体块，其中，L为烷基硫代膦酸酯基。

11、根据权利要求6的二聚体块，其中，G为亚磷酰胺基或H-膦酸酯基。

12、用二聚体块装配含有氨基磷酸酯、烷基膦酸酯、硫代磷酸酯和/或烷基硫代膦酸酯核苷酸间连键的寡核苷酸的方法，该方法包括以下步骤：将根据权利要求11的二聚体块与正在增长的寡核苷酸链上的自由5′羟基缩合，或与连接于固体支持物上的自由羟基缩合。