[发明专利]α-半乳糖苷酶

权利要求书

1.含有编码具有α—半乳糖苷酶活性多肽的DNA序列的DNA构建体，其中DNA序列a)编码含有附加的SEQ ID NO.3所示氨基酸序列的各肽，或b)是a)DNA序列的类似物，它可

i)在这里所限定的条件下，与附加的SEQ ID NO.1或2所示的DNA序列，或者与根据所说DNA序列或SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列制备的寡核苷酸探针杂交，

ii)编码可与抗体反应的多肽，此抗体可与含有附加的SEQ IDNO.3所示氨基酸序列多肽的至少一个抗原决定簇反应，和/或

iii)编码与具有附加的SEQ ID NO.3所示氨基酸序列的多肽至少有50％相同的多肽。

2.如权利要求1的DNA构建体，其中DNA序列衍生于微生物、植物或哺乳动物。

3.如权利要求1或2的DNA构建体，其中DNA序列衍生于细菌或真菌。

4.如权利要求1—3中任一项的DNA构建体，其中DNA序列衍生于曲霉属菌株，特别是黑色曲霉菌株。

5.如前述权利要求中任一项的DNA构建体，其中编码α—半乳糖苷酶的DNA序列如本文所述经等电聚焦测定其PI范围为4.0—5.5，在本文所述条件下测定其最适PH范围为5.0—7.0，最适温度约为170,000Da、和/或比活性约大于250GALU/mg蛋白质。

6.如权利要求1—5中任一项的DNA构建体，其中DNA序列如附加的SEQ ID NO.1或2所示。

7.如前述权利要求中任一项的DNA构建体，其中DNA序列是cDNA序列，基因组DNA序列或者合成的DNA序列或者混合的cDNA、基因组的和/或合成的DNA序列。

8.重组表达载体，它含有如权利要求1—7中任一项的DNA构建体。

9.含有如权利要求1—7中任一项的DNA构建体的细胞或者如权利要求8的载体。

10.如权利要求9的细胞，是微生物细胞。

11.如权利要求10的细胞，是细菌细胞、酵母菌细胞或真菌细胞。

12.如权利要求11的细胞，其中细菌细胞是革兰氏阳性细菌的细胞，如芽孢杆菌或链霉菌，或为革兰氏阴性细菌的细胞，如大肠杆菌，酵母菌细胞是糖酵母属的细胞，真菌细胞是曲霉属的细胞。

13.由权利要求1—7中任一项的DNA构建体编码的α—半乳糖苷酶制品。

14.生产显示出α—半乳糖苷酶活性的α—半乳糖苷酶或其变异体的方法，包括在允许α—半乳糖苷酶或其变异体表达的条件下，在适当的培养基中培养如权利要求9—12中任一项的细胞，并从培养基中回收所得酶或其变异体。

15.如权利要求13所述的α—半乳糖苷酶制品将α—半乳糖苷水解为半乳糖和蔗糖的用途。

16.如权利要求15的用途，其中α—半乳糖苷存在于由豆科植物、坚果、种子、谷类、谷类食物或蔬菜制备的组合物中。

17.如权利要求16的用途，可用于在哺乳动物中对以α—半乳糖苷相连接的糖进行体内转化。

18.如权利要求17的用途，可用于预处理含有α—半乳糖苷的食物或饲料。

19.将如权利要求13的α—半乳糖苷酶制品作为消化辅助药的用途。

20.含有如权利要求13的α—半乳糖苷酶制品的食物或饲料。

21.生产经酶修饰的豆制品的方法，包括在如权利要求13的α—半乳糖苷酶制品存在下，将含有豆制品的组合物经受酶解处理以修饰。

22.转化豆制品的方法，包括：

a)将任选地存在于适当表达载体中的如权利要求1—7任一项的DNA构建体插入适当的宿主生物体，

b)在允许由DNA构建体编码的多肽表达的条件下，在适当的培养基中培养宿主生物体，并从培养基中回收所得多肽，和

c)在由步骤b)回收的多肽存在下，将含有豆制品的组合物经受酶解处理以修饰。