[发明专利]通过3-(羧乙硫基)丙酰-7-ADCA有效生产7-ADCA的方法无效
申请号: | 94192932.9 | 申请日: | 1994-07-29 |
公开(公告)号: | CN1087780C | 公开(公告)日: | 2002-07-17 |
发明(设计)人: | R·A·L·波文伯格;B·P·科伊科曼;A·霍伊科玛;J·M·范德拉恩;J·韦尔威基;E·德弗卢姆 | 申请(专利权)人: | 吉斯特·布罗卡迪斯公司 |
主分类号: | C12N15/52 | 分类号: | C12N15/52;C12N1/15;C12N15/80;C12N15/55;C12N9/48;C12P35/00;C12N9/00;//;C12R182;119) |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人: | 杜京英 |
地址: | 荷兰代*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 通过 羧乙硫基 丙酰 adca 有效 生产 方法 | ||
1.一种制备7-氨基去乙酸头孢烷酸(7-ADCA)的方法,包括:
a)在丝状真菌表达信号的转录和翻译调控之下,用扩环酶基因转化产黄青霉菌株;
b)所述菌株在培养基中发酵,并向所述培养基中加入3,3′-硫代二丙酸或其盐或酯,它们适于产生3-(羧乙硫基)丙酰-6-氨基青霉烷酸(3-(羧乙硫基)丙酰-6-APA),后者就地扩环形成3-(羧乙硫基)丙酰-7-ADCA;
c)从发酵液中回收3-(羧乙硫基)丙酰-7-ADCA;
d)将所述3-(羧乙硫基)丙酰-7-ADCA脱酰化;及
e)回收结晶的7-ADCA。
2.权利要求1的方法,其中产黄青霉菌株在AT基因表达信号的转录和翻译调控下用扩环酶转化。
3.权利要求1的方法,其中(e)步为过滤步骤。
4.根据以上权利要求任一项的方法,其中(c)步为:过滤步骤、和在PH低于约4.5时用与水不混溶的有机溶剂萃取发酵液滤液,再在PH4-10下用水将其反萃取。
5.根据权利要求1-3任一项的方法,其中扩环酶来自带棒链霉菌(Streptomyces clavuligerus)或Nocardia lactamdurans。
6.一种重组DNA载体,它含有与丝状真菌表达信号的转录和翻译调控序列有效连接的扩环酶编码DNA。
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