[发明专利]蛋白质的纯化

权利要求书

1.一种从一个含有一种补体受体蛋白的混合物中纯化这种补体受体蛋白的方法，将所述的混合物依次与一种阳离子层析支持剂、金属亲合层析支持剂、一种分子排阻层析支持剂相接触并从每个支持剂中选择性地洗脱出蛋白。

2.按照权利要求1所述的方法，其中受体从CR1、CR2、CR3和CR4中选择。

3.按照权利要求2所述的方法，其中受体是CR1及其片段。

4.按照权利要求3所述的方法，其中受体是一个CR1的可溶性片段。

5.按照权利要求4所述的方法，其中受体是TP10HD。

6.按照权利要求1所述的方法，其中阳离子层析支持剂选自于CM-23-、CM-32-、CM-52-纤维素；CM-和SP-交联葡聚糖，CM-和S-琼脂糖以及CM-650 S TOYOPEARL中，并且用加入一个缓冲过的盐溶液进行洗脱。

7.按照权利要求6所述的方法，其中支持剂是S-琼脂糖，盐是氯化钠。

8.按照权利要求6所述的方法，其中盐溶液是100mM磷酸钠，500mM氯化钠，pH8.0。

9.按照权利要求1所述的方法，其中金属亲合支持剂选自于硅胶，琼脂糖以及聚乙烯异丁烯酸共聚物中。

10.按照权利要求9所述的方法，其中取代基从IDA和TED中选择。

11.按照权利要求10所述的方法，其中支持剂为TOYOPEARLAF-CHELATE 650M。

12.按照权利要求1所述的方法，其中金属亲合支持剂为TOYOPEARL AF-CHELATE 650M并且用一个咪唑盐缓冲液选择性洗脱补体受体。

13.按照权利要求12所述的方法，其中咪唑盐洗脱缓冲液由50mM咪唑，100mM磷酸钠，500mM氯化钠组成，pH为8.0。

14.按照权利要求1所述的方法，其中分子排阻层析剂从SEPHACRYL，UTROGEL，FRACTOGEL，SUPEROSE以及TOYOPEARL HW55-F中选择。

15.按照权利要求14所述的方法，其中支持剂为TOYOPEARLHW55-F并且洗脱液为10mM磷酸钠，0.9％(w/v)的氯化钠，pH为7。

16.一种从含有一种补体受体蛋白组分的细胞条件培养基中纯化这种补体受体蛋白的方法，对介质依次进行(a)阳离子交换层析，(b)固定的金属亲合层析，(c)疏水性相互作用层析，(d)阳离子交换层析，和(e)分子排阻层析。

17.按照权利要求16所述的方法，其中阳离子交换层析所使用的支持剂是CM-23-、CM-32-、CM-52-纤维素；CM-和SP-交联葡聚糖，CM-和S-琼脂糖以及CM-650 STOYOPEARL中的一种，并且通过一个缓冲过的盐溶液洗脱。

18.按照权利要求17所述的方法，其中支持剂是S-琼脂糖，盐是氯化钠。

19.按照权利要求18所述的方法，其中盐溶液是100mM磷酸钠，500mM氯化钠，pH8.0。

20.按照权利要求17所述的方法，其中金属亲合支持剂是选自于硅胶，琼脂糖以及聚乙烯异丁烯酸共聚物中。

21.按照权利要求20所述的方法，其中取代基从IDA和TED中选择。

22.按照权利要求21所述的方法，其中支持剂为TOYOPEARLAF-CHELATE 650M。

23.按照权利要求16所述的方法，其中金属亲合支持剂为TOYOPEARL AF-CHELATE 650M并且用一个咪唑盐缓冲液选择性洗脱补体受体。

24.按照权利要求23所述的方法，其中咪唑盐洗脱缓冲液由50mM咪唑，100mM磷酸钠，500mM氯化钠组成，pH为8.0。

25.按照权利要求16所述的方法，其中疏水性相互作用层析支持剂选自于烷基C2-C8-琼脂糖、芳基琼脂糖、烷基硅胶、烷基-有机聚合物树脂中。