[发明专利]一种通过层析法制备含因子VIII的病毒灭活级分的方法

权利要求书

1.通过层析方法制备含因子VIII的病毒灭活级分的一种方法，其中一从冷沉淀物或血浆开始一可任选随后用氢氧化铝处理，在冷沉淀物溶解后至少进行一个使用膜层析的分离步骤。

2.按照权利要求1的方法，其中所述分离步骤在膜内或膜上排列有离子交换材料上，特别是阴离子交换材料的膜上发生。

3.按照权利要求1和/或2的方法，其中病毒灭活是通过用二或三烷基磷酸盐和非离子表面活性剂处理所述级分进行的。

4.按照权利要求1至3之至少一个的方法，其中病毒灭活通过巴氏灭菌步骤实施，任选随后进行使用膜层析的附加分离步骤。

5.按照权利要求1至4的之至少一个的方法，其中所述膜层析在对因子VIII具有高亲和力的材料上发生。

6.按照权利要求1至5之至少一个的方法，其中对因子VIII具有高亲和力的该材料被具有高和/或低分子量的配基修饰。

7.按照权利要求6的方法，其中所述材料用针对因子VIII的抗体修饰。

8.按照权利要求5至7之至少一个的方法，其中对因子VIII具有高亲和力的该被修饰材料带有对因子VIII具有高亲和力的固定配基。

9.按照权利要求1至8中任意一项的方法，其中该层析材料能够与待分离的因子VIII起相互疏水作用或带有介导相互疏水作用的合适配基。

10.按照权利要求1至9中至少一个的方法，其中待提纯的样品在具有对应于0至150mM氯化钠的低离子强度的水性系统中上样于含离子交换材料的膜上，任选用具有对应于200至400mM氯化钠溶液的较高离子强度的水性系统洗涤，然后用具有对应于500至1500mM氯化钠溶液的高离子强度的水性系统洗脱，而pH值维持在4至9。

11.按照权利要求1至10的至少一个的方法，其中待提纯的样品从允许因子VIII结合于针对因子VIII的抗体的溶液被上样到上面带有被吸附的因子VIII的亲和膜被任选地洗涤，然后用相当于例如1至6M尿素的浓度的离液剂或用相应地更高浓度的盐溶液洗脱。

12.按照权利要求1至10的至少一个的方法，其中待提纯的样品溶于具有很高离子强度的溶液，加样至表面带有疏水配基的膜上，并用具有低离子强度的溶液系统洗脱。

13.按照权利要求1至12的至少一个的方法，其中含因子VIII的该被洗脱级分被浓缩，灌装和/或冻干。

14.按照权利要求1至13的至少一个的方法，其中所述病毒灭活是通过用重量比最多达15％的去污剂处理进行的。

15.一种含因子VIII的级分，通过应用按照权利要求1至14的至少一个的方法取得。