[发明专利]用于将预定的改变引入靶基因中的化合物

权利要求书

1.一种用于将预定的改变引入靶基因中的化合物，该化合物是具有至多一个3′末端和一个5′末端的混合的核糖-脱氧核糖核酸，所述核酸还包含：

a)至少一段邻接的未配对碱基的区域，该未配对区域将核酸分成第一链和第二链，所述第一链和第二链是由所述邻接的未配对碱基区域连接起来的；

b)至少一段长度至少为15个碱基对的沃森-克里克规则配对的核酸区域，其中第一链的碱基对应于第二链的碱基；并且其中

c)第一链含有至少三个邻接的核糖核苷酸的区域，该区域在沃森-克里克规则配对的核酸区域内形成杂种双链。

2.权利要求1的核酸，其中至少三个邻接的核苷酸是核糖核酸酶H抗性的。

3.权利要求2的核酸，其中第二链不含有由2′-OMe或2′-O核糖组成的核苷酸，第一链不含有由2′-O核糖组成的核苷酸。

4.权利要求1-3中任一权项的核酸，该核酸包含杂种双链的15-50个碱基对。

5.权利要求1-3中任一权项的核酸，其中5′和3′末端在沃森-克里克规则配对的核酸区域内与互补链的相邻碱基形成沃森-克里克规则配对。

6.权利要求4的核酸，其中5′和3′末端在沃森-克里克规则配对的核酸区域内与互补链的相邻碱基形成沃森-克里克规则配对。

7.权利要求1-3中任一权项的核酸，该核酸还含有邻接的未配对碱基的第二区域，该未配对区域将核酸分成第一链和第二链，所述第一链和第二链是由所述邻接的未配对碱基的第二区域连接起来的。

8.权利要求1-3中任一权项的核酸，其中第一链含有两个核糖核酸酶抗性核糖核苷酸的区域，所述区域形成两个杂种双链区域，每个杂种双链区域的长度至少为8个碱基对，并且具有一段处于杂种双链区之间的同质双链的至少4个碱基对形成的插入区。

9.权利要求8的核酸，其中同质双链的插入区由4-50个2′-脱氧核糖碱基对组成。

10.权利要求1的核酸，其还含有：

i.第一和第二同源区，它们共同的长度是从20到60个核苷酸，该区域与靶基因同源；

ii.一段异源区域，它处于第一和第二同源区之间，长度为1到20个核苷酸，它与靶基因是异源的，并含有预定的改变，其中

靶基因是非酵母或真菌的真核细胞的基因。

11.权利要求10的核酸，其中第一和第二同源区共同含有20-60个核糖核酸酶H抗性核糖核苷酸。

12.权利要求10的核酸，其中一个核糖核苷酸被2′-O-甲基化。

13.权利要求10的核酸，其中每个核糖核苷酸被2′-O-甲基化。

14.权利要求10-13中任一权项的核酸，其中异源区由脱氧核糖核苷酸组成。

15.权利要求10-13中任一权项的核酸，其中异源区的长度是一个核苷酸。

16.权利要求10-13中任一权项的核酸，其中异源区含有靶基因的一个插入或缺失。

17.权利要求1的核酸，其中

第二链含有一段至少九个脱氧核糖核苷酸的区域，该区域与第

一链的核苷酸形成杂种双链；

5′和3′末端与沃森-克里克规则配对核酸的互补链的相邻碱基

形成沃森-克里克规则配对。

18.权利要求17的核酸，其中第一链含有一个核糖核酸酶H抗性核糖核苷酸。

19.权利要求17的核酸，该核酸含有杂种双链的至少九个邻接的碱基对。

20.权利要求17-19中任一权项的核酸，其中第二链包含5′和3′末端。

21.权利要求17-19中任一权项的核酸，它含有杂种双链的至少15个碱基对。

22.权利要求20核酸，它含有杂种双链的至少15个碱基对。

23.权利要求17-19中任一权项的核酸，其中第一链含有两个邻接的核苷酸的区域，它们形成两个杂种双链区，每个杂种双链区的长度至少是4个碱基对，在杂种双链区之间有一个由同质双链的至少一个碱基对形成的插入区。