[发明专利]具有弹性蛋白酶抑制活性的α-1-抗胰凝乳蛋白酶

说明书

                     相关申请文献

本申请是与此同时申请的序号为No.UPN-0963的美国专利申请的部分继续申请，所述的同时申请的申请是序号为No.08/005,898的美国专利申请和1993年1月15日申请的序号为08/005,908的美国专利申请的部分继续申请，它们则又是1991年7月24日申请的序号为07/735,322的美国专利申请。现在为5,266,465号专利的分案申请，而所述的07/735,322号申请又是1989年6月23日申请的序号为07/370,704的美国专利申请、现在为5,079,336号专利的分案申请。所有这些申请公开的内容在此均引为参考。

                     政府许可资料

本发明的工作曾得到了国家健康研究所许可号AG-10599和AR-39674的部分支持。美国政府可拥有本发明的某些权利。

发明领域

本发明涉及由重组DNA技术来生产蛋白质的领域。更具体地讲，本发明涉及能抑制弹性蛋白酶的蛋白质。

发明背景

抗胰凝乳蛋白酶(ACT)和α1蛋白酶抑制剂(α1-PI)是丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族的成员，并且它们具有极其相近的一级氨基酸序列和三维结构。然而，抗胰凝乳蛋白酶具有较窄谱的抑制活性。具体地讲，α1-PI是人嗜中性弹性蛋白酶(HNE)的有效抑制剂，而抗胰凝乳蛋白酶则是该酶的底物并被该酶钝化。Potempa，et al.，J.Biol.Chem.，1991，266，21482。

很清楚地认识到在介导许多分子和细胞的炎症机制中，人嗜中性弹性蛋白酶起着重要作用(Travis and Fritz，Am.Rev.Resp.Dis.1991，43，1412)。

看起来一些炎症介质受蛋白酶和蛋白酶抑制剂的调控。一个例子是肿瘤坏死因子(TNF)-通过TNF-介导的从嗜中性白细胞中释放组织蛋白酶G(cat G)来增强血小板的活化；而抗胰凝乳蛋白酶，ACT阻遏这种效应。Renesto，P.et al.，J.Immnol.，1991，146，2305。白三烯B4(LTB₄)和血小板活化因子(PAF)从TNF-刺激的嗜中性白细胞中合成和释放受α-1-蛋白酶抑制剂(α1PI)和ACT的阻遏，而被cat G和人嗜中性弹性蛋白酶(HNE)增强。Camussi，G.et al.，J.Exp.Med.，1988，168，1293 and Camussi，G.et al.，Eur.J.Biochem.，1989，182，661。

通过限制内源的或施给的抗-炎症试剂接近血管和组织的炎症反应的微环境可缓解有效的反应。例如，分泌型白细胞蛋白酶抑制剂(SLPI)，一种小的碱性多肽(11.7kD)，看来能够接近粘附嗜中性白细胞的下层微环境并保护局部组织免受嗜中性粒弹性蛋白酶的蛋白水解作用。弹性蛋白酶特异的氯甲基酮抑制剂，但不是α1PI，血清或血浆在体外以抑制人微管损伤的形式抑制嗜中性白细胞-介导的内皮损害。Nathan证明粘附性嗜中性白细胞以比悬浮的嗜中性白细胞明显不同的动力学产生氨自由基。Nathan，J.Clin.Invest.，1980，80，1550。还不知道在粘附的嗜中性白细胞和其下的组织间是否有高反应性的氧自由基和其产物的积累。