[发明专利]狂犬病毒疫苗病毒提纯方法无效
| 申请号： | 95100699.1 | 申请日： | 1995-03-25 |
| 公开（公告）号： | CN1132027A | 公开（公告）日： | 1996-10-02 |
| 发明（设计）人： | 孙富林;赵林;李爱华 | 申请（专利权）人： | 孙富林 |
| 主分类号： | A01N63/02 | 分类号： | A01N63/02 |
| 代理公司： | 中国科学院武汉专利事务所 | 代理人： | 黄文韬 |
| 地址： | 430071 湖北省武*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 狂犬病毒 疫苗 病毒 提纯 方法 | ||
【权利要求书】：
一种狂犬病毒疫苗病毒提纯方法，它包括毒种的选择、检定、毒力测定、细胞制备和细胞培养等工艺步骤，其特征是：
(1)弃细胞离心处理，将无菌的LD50达到103～104以上的狂犬病毒细胞培养液合并，以1000×g20分种离心处理，弃细胞，取狂犬病毒培养液，
(2)用醋酸调PH值，将狂犬病毒培养液的PH值调到6.7，
(3)摇匀静止，用机械或人工方法，将调好PH值的病毒培养液摇匀，再将之放入4℃的环境中，静止20分钟，
(4)弃培养液离心处理，将静止后的病毒培养液经1000×g40分钟离心处理，取出沉淀的狂犬病毒，
(5)用Tris调PH值，在沉淀的狂犬病毒中加入EDTA溶液，使之悬浮，再用Tris将其PH值调到7.8，
(6)弃沉淀杂质离心处理，将PH值为7.8的狂犬病毒悬浮液经1000×g20分钟离心处理，弃沉淀杂质，取上清，
(7)洗脱，将取得的上清上样至用NT缓冲液(PH7.8)平衡好的Sephade×G75柱上，用NT缓冲液洗脱，其流速为1毫升/分，
(8)检测与收集病毒，利用紫外分光光度计对平衡好的Sephade×G75柱上洗脱的病毒液进行检测，收集和合并病毒峰。
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