[发明专利]定点诱变的方法无效
申请号: | 95119768.1 | 申请日: | 1995-11-22 |
公开(公告)号: | CN1132790A | 公开(公告)日: | 1996-10-09 |
发明(设计)人: | 山下裕兄;友野润;喜多昭彦;野田晃弘;中岛和男;加藤郁之进 | 申请(专利权)人: | 宝酒造株式会社 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70 |
代理公司: | 柳沈知识产权律师事务所 | 代理人: | 巫肖南 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 定点 诱变 方法 | ||
1、一种定点诱变的方法,包括以下步骤:
(1)在体外用能催化链交换反应的蛋白质处理含有定点诱变靶DNA的载体以及含有引入靶DNA所需突变的DNA,以使链交换反应得以进行;和
(2)将所得载体引入宿主细胞。
2、根据权利要求1的定点诱变的方法,其中所说能催化链交换反应的蛋白质是RecA蛋白质。
3、根据权利要求1的定点诱变的方法,其中所说宿主细胞选自细菌、酵母菌、真菌、植物细胞和动物细胞。
4、根据权利要求1的定点诱变的方法,其中所说载体选自pUC-系列、pBR-系列和M13,宿主是大肠杆菌。
5、根据权利要求4的定点诱变的方法,其中所说载体在链交换反应之前用限制性酶在相应于与靶DNA互补的DNA区域内的位点处切开。
6、根据权利要求1的定点诱变的方法,进一步包含从宿主细胞中回收载体(其中已引入所需突变)的步骤(3)。
7、一种定点诱变的试剂盒,包含能催化链交换反应的蛋白质。
8、根据权利要求7的定点诱变的试剂盒,进一步包含链交换反应的缓冲液。
9、根据权利要求7的定点诱变的试剂盒,进一步包含都用作对照的载体和合成的寡核苷酸。
10、根据权利要求7的定点诱变的试剂盒,其中所说能催化链交换反应的蛋白质是RecA蛋白质。
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