[发明专利]生产紫杉烷型双萜的方法

说明书

本发明涉及生产包括紫杉醇的紫杉烷型双萜的方法，紫杉醇是用于治疗卵巢癌、乳癌、肺癌等的很好的药剂。

用于卵巢癌、乳癌、肺癌等的治疗药剂的紫杉醇是一种从短叶紫杉NUTT中分离出来后被鉴别出的紫杉烷(taxane)型双萜，紫杉是一种属于紫杉属紫杉科族的植物，紫杉醇有一个与上述药理活性有关的复杂的酯基。可以在短叶紫杉NUTT植物体的所有部分发现紫杉醇，但是据报导树皮中的紫杉醇的含量比所有其他部分都多。目前是从天然或载培的植物体中收集紫杉醇，但是属于紫杉属的该植物生长很慢，需要生长10多年才长到离地20cm高，此外，剥掉树皮后树就死，因此不容易得到大量的紫杉醇。如果可以通过使用组织培养的方法来合成紫杉烷型双萜例如紫杉醇和/或紫杉醇的前体的浆果赤霉素Ⅲ的话，那会是很有利的，因为可以不用砍树很容地得到大量的紫杉醇。

作为一种利用培养植物细胞来生产紫杉醇的一般方法，美国专利公开了一种利用培养的短叶紫杉NUTT的细胞生产紫杉醇的方法(USP 5,019,504)，但是，其中所介绍的紫杉醇的生产量仅是1-3mg/l，因此可足以用于工业生产。此外，通过利用一般地组织培养技术的细胞培养来生产紫杉醇是不稳定的，即使当通过选择可以高生产率的得到初生细胞时也很难保持再次培养时它的含量[E.R.M.Wickremesine等，World Congress on Cell and TissueCulture(1992)]。

另一方面，作为生产紫杉醇的现有技术，在颁布的Holton等人的USP 5,015,744的说明书中公开了一种由浆果赤霉素Ⅲ生产紫杉醇的半合成方法，在紫杉醇的生物合成中浆果赤霉素Ⅲ是一种前体。通过利用植物组织培养，可以生产半合成方法的原料例如浆果赤霉素Ⅲ，因此，也可以通过上述的半合成方法用植物组织培养来生产紫杉醇。

本发明的目的是提供一种简单的通过植物组织培养来生产紫杉烷型双萜的方法。

通过深入细致的研究，本发明人发现，通过在如下的条件下进行培养细胞的培养或生产紫杉烷型双萜的植物的培养组织的培养，可以改善培养中紫杉烷型双萜的生产率，因此完成了本发明，所说的条件是在晕斑素(Coronatines)、生产晕斑素的细菌、该细菌的培养液或培养提取物、环状多糖类、脂肪酸或茉莉酸的亚氨基或氨基衍生物的存在条件下。